高效液相色谱法测定肾炎解热片中连翘苷的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定肾炎解热片中连翘苷的含量的论文 作者：方晓明,曹爱民,包永睿 【摘要】 目的 建立肾炎解热片中连翘苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以shim-pak clc-ods (4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.025 mol/l磷酸水(20∶80)为流动相,流速1 ml/min,检测波长277 nm。结果 连翘苷进样量在0.12～0.5 μg范围内线性关系良好,平均回收率为97.1%(n＝5),rsd＝1.61%。结论 本试验含量测定方法可作为该制剂质量控制方法。 【关键词】 肾炎解热片；连翘苷；高效液相色谱法；含量测定 　　abstract：objective to establish a method for the determination of forsythin in shenyan jiere tablets by hplc. methods the separation ed on shim-pak clc-ods (4.6 mm×150 mm, 5 μm) ol/l h3po4 (20∶80) as mobile phase. the flol/min and uv detector . results the method had good average recovery ethod is accurate, reliable and can be used for quality control of the production. key ination 肾炎解热片由白茅根、连翘等14味中药组成,具有疏解风热、宣肺利水功能,用于急性肺炎的热重寒轻、头面眼睑浮肿等症的治疗。.本试验采用高效液相色谱(hplc)法对该制剂连翘中的连翘苷含量加以测定,经方法学考察,方法专属性、精密度、重复性、回收率试验均符合有关规定,为该制剂质量分析建立了可靠的控制方法。 　　1 仪器与试药 岛津lc-10a液相色谱仪,浙江大学n3000工作站；dl-360超声波仪,360 -pak clc-ods(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱；以乙腈-0.025 mol/l磷酸水(20∶80)为流动相,流速1 ml/min；检测波长277 nm。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取连翘苷对照品适量,加甲醇溶解制成每1 ml含40 μg的溶液,作为对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取本品20片研细,取粉末约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50 ml,密塞,称定重量,超声处理25 min,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密吸取续滤液25 ml,蒸至近干,用中性氧化铝2 g拌匀,加于中性氧化铝柱(100～120目,5 g,内径1～1.5 cm)上,用70%乙醇100 ml洗脱。收集洗脱液,浓缩至近干,残渣用甲醇20 ml溶解后转移至25 ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得。 　　2.4 阴性样品溶液的制备 按处方去除连翘,其他药味???变,按“2.3”项下方法制备阴性样品溶液。 　　2.5 方法专属性考察 精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10 μl,注入液相色谱仪中。测定结果提示,供试品具有与对照品相同保留时间色谱峰,阴性样品无干扰,方法专属性良好。见图1。 　　2.6 线性范围考察 精密吸取连翘苷对照品溶液(0.040 82 mg/ml)2、4、6、8、10 μl,注入液相色谱仪中。测定结果经回归处理,y＝ 1 514 338.03x＋3 350.79,r＝0.999 4。结果提示：连翘苷进样后在0.08～0.4 μg范围内线性关系良好。 　　2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10 μl,按前述色谱条件进样分析,测定时间为0、2、4、6、8 h,结果供试品溶液在8 h内稳定。色谱峰面积无明显变化,在此时间内,待测组分化学性质稳定。 　　2.8 精密度试验 精密吸取对照品溶液(0.040 82 mg/ml)10 μl,按前述色谱条件进样5次,结果提示,色谱峰面积rsd＝1.6%,符合有关规定,表明仪器精密度良好。 　　2.9 重复性试验 取同一批次样品5份,每份0.5 g,精密称定,按供试品溶液制备方法操作。分别吸取10 μl进样分析。测定结果显示,本品每片含连翘苷0.482 mg(n＝5)。 　　2.10 加样回收率试验 取已知含量样品(0.482 mg/片,片重0.3 g)5份,每份0.25 g,精密称定,精密加连翘苷对照品溶液(0.040 82 mg/ml)10 ml,其他按供试品溶液制备方法操作。测定结果见表1。表1 加