高效液相色谱法测定荜茇止痛酊中胡椒碱的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定荜茇止痛酊中胡椒碱的含量的论文 【摘要】 目的 建立荜茇止痛酊中胡椒碱的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,c18色谱柱,四氢呋喃-甲醇-水(v∶v∶v＝30∶30∶50)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为室温,检测波长为343 nm,进样10 μl,以外标法计算含量。结果 胡椒碱在8.3～41.5 mg/l内峰面积与对照品质量浓度呈良好线性关系,其回归方程为：a＝3 413 186ρ－ 7 467.7,r＝0.999 8；其平均回收率为99.7%,rsd＝1.8%(n＝6)。结论 该方法简便,重复性好,空白无干扰,可有效地控制荜茇止痛酊制剂的质量。 【关键词】 荜茇止痛酊；胡椒碱；高效液相色谱法 abstract：objective to establish the method of content determination of piperine in biba zhitong tincture. methods hplc ining the content of piperine in biba zhitong tincture. c18 chromatographic column n temperature being the room temperature. the mobile phase ethanol-l/min. the detection , and the sampling volume ethod g/l) shoass concentration of control group. its regression equation ethod is simple, convenient, good reproducibility and non-interference, and can effectively control the quality of the preparation. key m×250 mm,10 μm),大连依科特科学仪器有限公司；流动相：四氢呋喃-甲醇-水(v∶v∶v＝30∶30∶50)；流速：1.0 ml/min；检测波长：343 nm；柱温：室温；分离度：rgt;1.5；理论板数按胡椒碱峰计算应大于1 500。 　　2.2 检测波长的选择 对胡椒碱的乙醇溶液进行紫外区扫描,结果胡椒碱在343 nm处有最大吸收,故选用343 nm作为检测波长。 　　2.3 流动相的选择 曾试验4种流动相：①甲醇-水(77∶23)；②乙腈-水(70∶30)；③乙腈-0.05 mol/l磷酸二氢钠溶液(70∶30),用磷酸调节ph为3.5、3.1；④四氢呋喃-甲醇-水(30∶30∶50),其中④使胡椒碱峰与杂质峰分离效果好,能基线分离。 　　2.4 溶液的制备 对照品溶液的制备：精密称取胡椒碱对照品10 mg,置50 ml棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀。精密量取5 ml,置50 ml棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1 ml中含胡椒碱20 μg)。 　　供试品溶液的制备：精密量取荜茇止痛酊1 ml,置25 ml棕色量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,于冰箱中冷藏1.5 h,取出,放置至室温,滤过,取续滤液5 ml,置25 ml棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,即得。 　　阴性对照液的制备：按处方中药味的比例自配不含荜茇的群药,按其工艺制成阴性制剂,再按供试品溶液制备方法制成空白溶液,即得。 　　2.5 阴性液干扰试验 　　精密吸取供试品溶液、阴性液和对照品溶液各10 μl注入色谱仪中,由色谱图可知,在与对照品色谱峰保留时间相应的位置上,供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰出现；而阴性液在此峰位无吸收,对本品中胡椒碱的含量测定无干扰,色谱图见图1。 　　2.6 线性关系的考察 　　精密吸取胡椒碱对照品(10.38 mg→50 ml)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml,分别置25 ml棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取10 μl,注入高效液相色谱仪,记录峰面积。以对照品的含量对峰面积值作图,得到一个通过原点的直线,并绘制标准曲线。结果表明,胡椒碱在8.3～41.5 mg/l范围内峰面积与对照品质量浓度呈良好线性关系,其回归方程为：a＝3 413 186ρ－7 467.7,r＝0.999 8。 　　2.7 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液(批号041212),重复进样5次,求得rsd＝0.93%。 　　2.8 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液(批号041212),分别于配制后0、2、4、8、16、24 h测定色谱峰面积,计算rsd为1.2%,结果表明,其在24 h内基本稳定。