高效液相色谱法测定甘草中甘草查尔酮A的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定甘草中甘草查尔酮A的含量的论文 作者：崔永明，石月，陈悟，曾庆福，余龙江 【摘要】 　　目的建立甘草中甘草查尔酮a的含量测定方法。方法采用高效液相色谱（hplc）法，使用hypersil ods2色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm），以甲醇-水-冰醋酸（60∶40∶1）为流动相，流速1.0 ml·min-1, 检测波长为372 nm，柱温 25℃。结果甘草查尔酮a线性范围0.2～1.0 μg, r=0.999 2；精密度实验rsd为1.51 %；重复性实验rsd为2.54 %；稳定性实验rsd为1.72 %；平均加样回收率98.76 %，rsd=1.94 %。结论该方法灵敏、准确，重复性好，可作为甘草中甘草查尔酮a的含量测定方法。 【关键词】 甘草 甘草查尔酮a 高效液相色谱法 　　abstract：objectiveto establish a determination method of licochalcone a in licorice. methodsusing hplc method, the system consisted of hypersil ods2 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm),mobile phase of methanol-ixture, l·min-1; detection column temperature of 25 ℃. resultslinear range ean recovery ethoed is sensitive, accurate and ination method of licochalcone a. 　　key g·ml-1的对照品储备液，待用。 　　2.1.2 供试品溶液的制备准确称取干燥恒重甘草粉末（过60目筛）0.5 g，置100 ml具筛锥形瓶中，加入甲醇25 ml，超声处理（功率200 in，过滤，再加入甲醇20 ml，超声处理30 min，合并滤液，减压浓缩至干，加流动相溶解并定容至50 ml，微孔滤膜(0.45 μm)过滤，即得供试品溶液。 　　2.2 色谱条件 　　色谱柱为大连依利特 hypersil ods2 c18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；柱温25℃；流动相为甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶1)；检测波长372 nm；流速1.0 ml·min-1。 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 线性关系考察 　　准确吸取甘草查尔酮a对照品储备液2，4，6，8，10 ml分别置于5个10 ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度。分别吸取上述对照品溶液各10 μl，依次注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以浓度c(μg/ml)为横坐标，色谱峰面积a为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：a=41 308 c-142 057，r=0.999 2， 线性范围为：0.2～1.0 μg。 　　2.3.2 精密度实验 　　准确吸取浓度为100 μg·ml-1的甘草查尔酮a标准品溶液10 μl，重复进样5次，测得峰面积值， 计算 相对标准偏差rsd为1.51%，说明仪器良好。 　　2.3.3 重复性实验 　　准确称取同一批次的胀果甘草5份，按“2.1.2”项下制备样品溶液，依次测定，根据标准曲线换算甘草查尔酮a的含量，计算甘草查尔酮a含量的rsd为2.54%，表明实验方法重复性较好。 　　2.3.4 稳定性实验 　　取同一份待测供试品溶液，在0, 2, 4, 8, 12 h进样测定，测得甘草查尔酮a峰面积值并计算样品峰面积的rsd为1.72%，表明供试品溶液于12 h内稳定。 　　2.3.5 加样回收率实验 　　准确称取已知含量的样品约0.1 g(共5份)，精密加入0.10 mg/ml的甘草查尔酮a标准品1 ml，按“2.1.2”项下方法制备所需溶液，测定并 计算 含量。表1结果表明甘草查尔酮a平均回收率为98.76 %，rsd为1.94 %。表1 样品加样回收率实验结果（略） 　 　　2.4 样品测定 　　按照本方法的测定条件，分别测定《 中国 药典》收录的3种甘草样品，计算甘草查尔酮a的含量，结果见表2。甘草查尔酮a标准品及样品hplc图谱见图1～2。表2 甘草查尔酮a含量测定结果（略） 　 　 　3 讨论 　　3.1 色谱条件选择 　　比较了乙腈-水(60∶40)、甲醇-水(70∶30)、甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶1)、乙腈-甲醇-水(40∶30∶30)等流动相体系，结果第3种流动相分离效果最好，所以，本文选用甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶1)为流动相。 　　3.2 溶液制备方法 　　比较了不同提取溶剂（甲醇