高效液相色谱法测定木樨科苦丁茶中槲皮素的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定木樨科苦丁茶中槲皮素的含量的论文 作者：陈艺文,李先荣,倪 艳,卢方晋 【摘要】 目的 建立测定木樨科苦丁茶中槲皮素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为hypersil ods2 (4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-0.4%磷酸(47∶53)为流动相,流速为1 ml/min,检测波长为360 nm。结果 槲皮素的线性范围为0.050 4～1.008 0 μg,r＝0.999 99；平均回收率为101.61%,rsd＝1.75%(n＝5)。结论 该方法简便、准确,可以作为木樨科苦丁茶的质量控制依据。 【关键词】 木樨科苦丁茶；槲皮素；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to set up the determining method of quercetinum in kuding cha of ligustrum by hplc. method hypersil ods2 chromatographic column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) ethanol- 0.4% phosphoric acid (47∶53) obile phase, the flol/min, and the detecting . result the linear range of quercetinum ethod is convenient and accurate, and can used be as basis of quality control for kuding cha of ligustrum. key ；quercetinum；hplc；content determination 苦丁茶具有清热解毒、杀菌消炎、健胃消积、止咳化痰、生津止渴、提神醒脑的功效。.随着对苦丁茶木樨科女贞属植物药理作用研究的深入,发现女贞属植物具有多种生理活性,它们的根、叶、果实大多具有清热、解毒、止痛、止血、止咳、抑菌及降压作用。为控制其质量,我们采用高效液相色谱法测定了其主要化学成分槲皮素的含量,现报道如下。 　　1 仪器与试药 样品药材由山西省中医药研究院中药房提供,经鉴定为木樨科女贞属变紫女贞的干燥叶。槲皮素对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号081-9304)。agilent 1100高效液相色谱仪。甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为hypersil ods2(4.6 mm×250 mm,5 μm)；甲醇-0.4%磷酸(47∶53)为流动相；检测波长360 nm,柱温30 ℃,理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于4 000。色谱图见图1。 　　2.2 供试品溶液的制备 取本品粉末(过3号筛)约1.0 g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加80%甲醇25 ml,密塞,称定重量,加热回流1 h,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10 ml,加入盐酸1 ml,置90 ℃水浴锅中加热回流1 h,取出,立即冷却,转移至25 ml量瓶中,加80%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。 　　2.3 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品2.52 mg,置50 ml量瓶中,加80%甲醇至刻度,摇匀,即得每1 ml含50.4 μg的溶液。 　　2.4 线性关系考察 分别精密吸取槲皮素对照品溶液(50.4 μg/ml)1、2.5、5、10、15、20 μl进样,按上述色谱条件测定。以峰面积(积分值)为纵坐标,进样量(μg)为横坐标做图,计算回归方程。回归方程为：y＝3 675x＋0.283 1,r＝0.999 99,结果表明,槲皮素进样量在0.050 4～1.008 0 μg范围内呈良好线性关系。 　　2.5 精密度试验 精密吸取槲皮素对照品溶液(50.4 μg/ml)10 μl,重复进样5次,结果峰面积的平均值为1840.8,rsd＝0.86%。 　　2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液,在0、2、4、6、8 h分别进样10 μl,测得样品中槲皮素峰面积值rsd＝1.91%,结果表明,供试品溶液在8 h内稳定性良好。 　　2.7 重复性试验 按拟定的含量测定方法,对同一批样品分别制备5份供试品溶液,精密吸取10 μl,进样,测得槲皮素的平均含量为0.408 6 mg/g,rsd＝2.86%。结果表明,本法重复性较好。 　　2.8 加样回收率试验 　　取已测知含量样品0.5 g,研细,精密称取5份,精密加入槲皮素对照品0.20 mg,按《中华人民共和国药典》“含量测定”[1]项下方???测定,计算回收率,结果见表1。 表1