日常用品的抑的菌实验论文.docVIP

不同日用化学品的抑菌效果探究 西南位育中学：孙思敏、陈哲、孟思妤、林杰希 指导老师：吴彦君 一、前言 随着我国城乡经济的快速发展,人们的相互交往日益广泛,给各种传染性疾病的传播增加了机会。所以,研究开发具有消毒灭菌、洗涤去污、稳定性好、无毒副作用等功能的家庭日用化学品,具有较大的社会效益和经济效益。随着生活水平的提高,人们对家庭常用日用化学品(牙膏、洗洁精、洗发水、洗手液)抑菌要求越来越高。就此近日我们对不同日用化学品的抑菌效果进行了实验与探究。以下为主要的实验过程。 二、关键词：日用化学品、抑菌、大肠杆菌 三、实验器材和方法 （一）实验准备 ： 1. 化学用品： ????供试细菌编号产品名称产地主要成分大肠杆菌枯草杆菌金黄色葡萄球菌1?夏士莲洗发露?安徽?十二烷基醇醚硫酸钠、聚季铵盐-10、水???2上海防酸牙膏?上海?山梨醇、水合硅石、水、氯化锶???3?target洗手液?美国?酒精、液体蜡、油酸皂??? 图1：三种日用化学品 P.S.:3种日用化学品均在有效使用期内。 2.菌种：大肠杆菌，接种普通营养琼脂，37℃，24 h。 3.培养基种类：琼脂凝胶培养基 4.实验器材：小试管、锥形瓶、培养皿、烧杯、量筒、玻璃棒、药匙、剪刀、标签贴纸、标记笔、牛皮纸、灭菌带、三角玻扒、接种环 （二）实验步骤： 1.培养基的配置： （1）成分：蛋白胨1.6g，牛肉膏0.48g，氯化钠0.8g，琼脂2.72g，蒸馏水160mL，pH7.2。（如图2所示：左起氯化钠、蛋白胨、牛肉膏、琼脂） 图2：培养基的成分 （2）制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于锥形瓶内， 121℃，20min高压灭菌备用。（附带圆形抑菌片消毒） 图3：配置好的培养基液体 2. 培养基的分装： 每个组员1支试管中注入10ml培养基并将试管捆扎放进烧杯中，其余倒入锥形瓶。（如图4所示） 图4：培养基分装在试管中 3. 培养基的高温灭菌：121℃ 20min 高压蒸汽灭菌锅 4.油镜观察大肠杆菌： （1）制片 涂菌：用无菌操作方法从试管中沾取菌液一环，用接种环在洁净无脂的载玻片上做一薄而均匀、直径约1cm的菌膜。涂菌后将接种环火焰灭菌。 干燥：于空气中自然干燥。亦可把玻片置于火焰上部略加温加速干燥(温度不宜过高)。 固定：目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上，便于染料着色，常用加热法，即将细菌涂片面向上，通过火焰3次，以热而不烫为宜，防止菌体烧焦、变形。此制片可用于染色。 （2）染色 染色：将涂片置于水平位置，滴加染色液覆盖于涂菌处，染色约2min。 水洗：倾去染色液，斜置载片，用自来水的细水流由载片上端流下，不得直接冲在涂菌处，直洗至从载片上流下的水中无染色液的颜色为止。 干燥：自然晾干或用吸水纸轻轻地吸干，注意不要擦掉菌体。 待标本完全干燥后，先用低倍镜和高倍镜观察，将典型部位移至视野中央，再用油镜观察。 图5：大肠杆菌载玻片制作 （3）观察 将标本片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的位置，然后提高镜筒，在标本的待检部位滴镜油一滴，再换油镜观察。 转动粗调节器使载物台徐徐上升（或使镜筒渐渐下降），直至油镜头浸没至油中。此时眼睛应从侧面观察，避免压碎标本片和损坏镜头。 然后双眼移至接目镜，一面从接目镜观察，一面反方向缓慢地转动粗调节器（下降载物台，或上升镜筒），当出现模糊物象时，换用细调节器，转动至物象清晰为止。 观察完毕，应先提高镜筒，并将油镜头扭向一侧，再取下标本片。油镜头使用后，应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。 图6：油镜观察大肠杆菌 5. 倒平板与摆斜面： （1）戴好手套，将三角瓶中的凝胶培养基倒入培养皿中，高度约为培养皿高度的1/2。 （2）摆斜面：戴好手套，将试管中的凝胶培养基拿出灭菌锅倾斜15，放置于操作台上。（如图7所示） 图7：倒平板 6.抑菌液的配置与抑菌片制作： （1）抑菌液的配制：将各样品 4 g分别放入对应的锥形瓶中，加蒸馏水4 ml，振荡至样品完全溶解 ，配制成1：1的样品液。 （2）抑菌片的制作：将消毒过的无菌滤片浸入到抑菌液中，浸10——15min。 图8：抑菌片的制作 7.菌种的涂布与抑菌片放置： （1）菌种的涂布：将菌液分离样品摇匀，将0.1ml菌悬液小心地滴在平板培养基表面中央位置。右手拿无菌三角玻扒在平板培养基表面上,将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动,使之分布均匀，然后改变方向沿另一垂直来回推动,平板内边缘处可改变方向用三角玻扒再涂布几次。(如图9所示) 图9：菌种的涂布 （2）抑菌片的放置：将抑菌片用镊子从抑菌液中夹出，放入培养皿。（如图10所示） 8.观察抑菌圈大小并