HSP90β基因突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系.docVIP

　　HSP90β基因突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系 作者：赵艳，王华，陈星云，季业伟，周元国 【关键词】 热休克蛋白90β；糖皮质激素类；突变 　　【Abstract】 AIM: To screen the mutation of heat shock protEin 90β(HSP90β) gene in patients ary nephrotic syndrome and to investigate the association betutation and the sensitivity to glucocorticoid therapy. METHODS: Extract the blood DNA of the 300 glucocoiticoidtreated primary nephrotic syndrome patients. PCR approach plify intron 9, exon10, intron 10, exon11 and 3 untranslated region of HSP90β, and automated fluorescent sequencing technology utation of the region. RESULTS: Tutations of HSP90β, 7489 Cgt;T in intron 10 and 7612 Cgt;T in 3 untranslated region ary nephrotic syndrome patients. The mutation frequency of glucocoiticoidsensitive and glucocoiticoidresisted patients ary nephrotic syndrome patients ,but there utation 　　【摘要】 目的： 筛选肾病综合征患者热休克蛋白90β（heat shock protein 90, HSP90）基因突变,并 分析 该突变与糖皮质激素 治疗 敏感性的关系. 方法 ： 提取300例经糖皮质激素治疗的肾病综合征患者血液DNA，采用聚合酶链反应 (polymerase chain reaction)和自动荧光测序方法, 对HSP90基因intron 9， exon10， intron 10， exon11，3非编码区域DNA 序列进行突变分析，结合临床资料探讨突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系. 结果： 在肾病综合征患者中发现了2个HSP90β基因点突变，分别为intron 10的7489 Cgt;T和3非编码区的7612 Cgt;T,其发生频率在糖皮质激素敏感和不敏感患者中分别为（2.44%，3.68%）和（2.44%，2.94%）,两组患者的突变频率无统计学差异(Pgt;0.5). 结论： 在肾病综合征患者中发现9例7489 Cgt;T和8例7612 Cgt;T突变，在敏感和不敏感组的发生频率无显著差异，提示HSP90β表达量与GC治疗敏感性无显著相关. 　　【关键词】 热休克蛋白90β；糖皮质激素类；突变 　　0引言 　　 　　热休克蛋白90（heat shock protein 90, HSP90）是体内普遍存在、高度保守的一类分子伴侣蛋白，是热休克蛋白家族中的重要成员之一，在正常细胞内有较高的组成性表达，约占细胞内蛋白含量的1%~2%［1］，它们参与众多的细胞生理过程. 有人［2］在高加索人中检测到HSP90基因突变，但未作进一步的分析. 因此，HSP90在糖皮质激素糖皮质激素受体（glucocorticoidglucocorticoid receptor, GCGR）信号转导中的作用尤其引起我们的关注. 但 目前 国内尚无人HSP90基因变异以及与GCGR效应或激素敏感性的相关 研究 ，故本研究旨在筛查肾病综合征患者的HSP90β是否存在突变，并分析该突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系，进一步探讨HSP90β在糖皮质激素治疗敏感性差异中的作用，为临床治疗提供 理论 基础和实践指导. 　　1对象和方法 　　1.1对象所收集病例来自第三军医大学新桥 医院 和大坪医院，均符合1985年中华全国第二次肾病学术会议制订的肾病综合症诊断标准，治疗方法采用激素治疗标准方法. ① 敏感组： 激素治疗后8 L ,置-20 ℃冻存待检. DNA纯化试剂盒购自Promega公司; Taq 多聚酶购自宝生物公司. 细胞裂解液Ⅰ： 10 mmol/L Tris.Cl, 10 mmol/L KCl, 10 mmol/L MgCl. 细胞裂解液Ⅱ： 10 mmol/L Tris.Cl, 10 mmol/L KCl, 10 mmol/