丹参酮ⅡA对人胃腺癌细胞SG.docVIP

　　丹参酮ⅡA对人胃腺癌细胞SG 作者：周晓丽　宋政军　王旭艳 【摘要】 　　目的 体外实验检测丹参酮ⅡA(TanⅡA)对SGC7901人胃腺癌细胞增殖、凋亡的 影响 ，探讨其可能的作用机制。 方法 体外常规培养SGC7901人胃腺癌细胞用于实验，经TanⅡA作用后，采用MTT比色法检测细胞增殖情况，电镜及流式细胞仪观察胃腺癌细胞凋亡及细胞周期分布。结果 TanⅡA对胃腺癌细胞的生长有明显的抑制作用，呈剂量依赖性，与对照组相比差异有统计学意义(Plt;0.01)；TanⅡA作用后胃腺癌细胞表现为凋亡特征性的形态改变；TanⅡA可时间依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡。结论 TanⅡA对体外培养的SGC7901人胃腺癌细胞的生长有明显的抑制作用和诱导凋亡的作用，其可能的机制为TanⅡA可将细胞阻滞于G0/G1期，使其不能进入S期。 【关键词】 丹参酮ⅡA；胃腺癌；凋亡 　　 The effect of Tanshinone ⅡA on proliferation and apoptosis of　human gastric adenocarcinoma cell line SGC7901 　　ABSTRACT: Objective To observe the effect of Tanshinone ⅡA on proliferation and apoptosis of human gastric adenocarcinoma cell line SGC7901 and its mechanism. Methods The human gastric adenocarcinoma cell line SGC7901orphology ission electron microscopy. The cell cycle distribution and the apoptotic rate etry. SGC7901 cell apoptosis atin concentration and fragmentation as ation of apoptotic bodies anner. Tanshinone ⅡA could induce the apoptosis in timedependent manner. Conclusion Tanshinone ⅡA has effect in inhibiting SGC7901 cells and inducing the apoptosis. The apoptotic rate and percentage of cells in G1 phase increased in the SGC7901 cells treated by Tanshinone ⅡA. 　　KEY SO)中4℃冷藏备用。RPMI1640培养液购自GIBCO公司；人胃腺癌细胞株(SGC7901)由西安 交通 大学医学院第一附属 医院 临床分子实验中心提供，37℃恒温，50%(体积分数)CO2密闭传代培养。 　　1.2 方法 TanⅡA溶解于DMSO。DMSO终浓度为0.02%(体积分数)。用细胞培养液将TanⅡA配制成0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L不同质量浓度的工作液，设0mg/L浓度为对照组。实验将根据MTT结果选取最佳作用浓度的TanIIA处理癌细胞。 　　1.2.1 MTT比色法检测SGC7901细胞的增殖 将SGC7901细胞用胰蛋白酶消化后，血细胞计数盘计数，用含10%(体积分数)??牛血清的1640培养液制备为2×105个/mL细胞悬液，接种于96孔细胞培养板内，每孔200μL，生长24h后，随即将其分为6个作用组，每组6复孔。分别加入终浓质量度为0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L的TanⅡA培养液,分别于作用24、48、72h后每孔加入新鲜配置的5g/L MTT储存液20μL，继续孵育4h后，弃去上清液，每孔再加入150μL DMSO溶解细胞内结晶，5-10min后，490nm酶标测定仪测定吸光度(A)值。抑制率=(对照孔A490-实验孔A490)/对照孔A490×100%。 　　1.2.2 透射电镜观察 收集处于对数生长期的SGC7901人胃腺癌细胞，接种于25mL培养瓶内，随机分为两组，分别加入0、10.0mg/L TanⅡA，每组各6瓶细胞。药物处理细胞72h后，用胰蛋白酶消化细胞，置于EP管中，2000r/min，离心10min，弃去上清，收集细胞。加入4℃预冷前固定液20g/L戊二醛固定2h，PBS液清洗，10g/L锇酸固定1-2h，梯度脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色，透射 电子