丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制.docVIP

　　丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制 作者：李浩，刘开祥，俸军林，曾爱源，唐永刚 【摘要】 　　目的探讨丹参酮ⅡA（Tan ⅡA）对缺血再灌注损伤大鼠保护作用及对额顶部皮质中性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan ⅡA低剂量 治疗 组和Tan ⅡA高剂量治疗组，线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Tan ⅡA高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给药3 d，1次/d。用生化法观察缺血90 min再灌注24 h大鼠额顶部皮质髓过氧化物酶（MPO）活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）含量、三磷酸腺苷（ATP）含量及脑含水量变化，并进行2，3，5－三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测脑梗塞体积。结果Tan ⅡA治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小，高、低剂量组之间差异亦具有显著性（Plt;0.05）；与缺血再灌注组比较，Tan ⅡA治疗组显著降低MPO活性、MDA含量，增加SOD 、ATP含量，降低脑组织含水量，高、低剂量组之间差异亦具有显著性（Plt;0.05）。结论Tan ⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用，其机制可能与减轻缺血再灌注损伤炎症反应，减轻氧化性损伤和改善能量代谢有关。 【关键词】 缺血再灌注； 髓过氧化物酶； 自由基； 三磷酸腺苷； 丹参酮Ⅱ 　　Abstract：ObjectiveTo study the effect of Tanshinone ⅡA (Tan ⅡA) on neutrophils infiltration and the contents of free radical and ATP in ischemic frontal and parietal cortex of cerebral ischemia reperfusion（I/R） rats.MethodsIn this experiment, rats ly divided into 4 groups, namely sham operated group, I/R group,loiddle cerebral artery occlusion(MCAO) model ade by suture-occluded method.Rats in MCAO folloic frontal and parietal cortex e.Resultspared e in loanner (all Plt;0.05). pared ay aueviate cerebral ischemia-reperfusion injury by decreasing the inflammation reaction , free radicals and the disbanlance of energy metabolism. 　　Key ia-reperfusion; Myeloperoxidase; Free radical; ATP；Tanshinone ⅡA 丹参Salvia miltorrhiza Bge为唇形科多年生草本植物，是我国传统具有活血化淤作用的中药，已被广泛用于心脑血管疾病的治疗，但其作用机制尚不十分清楚。丹参酮( Tanshinone)是丹参的有效活性组分，其中丹参酮ⅡA（Tanshinone ⅡA，Tan ⅡA） 为丹参酮中含量最高的活性成分。本实验采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，研究丹参酮ⅡA对大鼠脑缺血再灌注损伤缺血区额顶部皮质中性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢、脑组织含水量及梗塞体积变化的影响，探讨其对脑再灌注损伤保护作用机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 药品与试剂 　　Tan ⅡA由提供上海第一生化药业有限公司提供，纯度85％。髓过氧化物酶（MPO），丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。TTC购自 中国 医药集团上海化学试剂公司。 　　1.2 动物分组及给药方法 　　健康PO活性的测定 　　再灌注24h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5 min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7～11 mm之间的额顶部皮质，以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆。严格按试剂盒说明书步骤要求操作， 计算 出MPO活力单位。 　　1.5 MDA和SOD的测定 　　再灌注24h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5 min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7～11 mm之间的额顶部皮质，以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆（步骤和方法同上）。严格按试剂盒说明书步骤要求操作，计算出MDA和SOD含量。 　　1.6 三磷酸腺苷（ATP）含量测定 　　再灌注24 h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5 min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖