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　　二烯丙基二硫化物对HL 作者：谢熠，范自力，姚晨姣，谭三勤，赵亚丽 【摘要】 为了 研究 二烯丙基二硫化物（diallyl disulfide，DADS）对白血病HL-60细胞株VEGF mRNA的表达及VEGF蛋白分泌的作用，并从 影响 VEGF生成的角度探讨DADS的抗白血病机制， 应用 ELISA法检测药物作用前后白血病HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量； RT-PCR法检测药物作用前后白血病HL-60细胞VEGF mRNA的相对含量。结果表明： HL-60细胞中均有VEGF mRNA的表达和VEGF蛋白的分泌；与空白对照相比，DADS 3个浓度组（0.625，1.25，2.5 μg/ml）作用HL-60细胞48小时和72小时均能下调HL-60细胞VEGF mRNA的表达及VEGF蛋白的分泌（Plt;0.01）。3个浓度组间差异显著（Plt;0.01），其下调HL-60细胞VEGF mRNA的表达及VEGF蛋白的分泌效果与浓度相关（rgt;0.9，Plt;0.01）。结论： DADS可能通过抑制VEGF mRNA的表达及VEGF蛋白的分泌发挥抗白血病效应。 【关键词】 二烯丙基二硫化物 　　Effect of Diallyl Disulfide on Expression and Secretion of VEGF in HL-60 Leukemic Cells 　　Abstract The study ed to investigate the expression of VEGF mRNA and VEGF protEin in HL-60 cells treated ic mechanism of DADS in respect of VEGF production.Semi-quantitative RT-PCR and ELISA RNA and secretion of VEGF protEIn in HL-60 cell lines treated by DADS respectively. The results shoRNA and secretion of VEGF protein RNA and secretion of VEGF protein in HL-60 cells could be doent L DADS for 48 and 72 hours and the effects had a dose dependent relationship（rgt;0.9，Plt;0.01）.The differences betong three DADS-treated HL-60 cell groups（Plt;0.05）. It is concluded that DADS effectively inhibits the proliferation of human leukemia cell line HL-60 cells; DADS exerts its antileukemic effects by reduction of the expression of VEGF mRNA and VEGF protein secretion. 　　Key ia; vascular endothelial groa 公司产品，相对分子质量为300.44，纯度≥98 % 。TRIZOL购自美国Gibco BRL公司；cDNA合成试剂盒、dNTP、 TaqDNA聚合酶均购自晶美生物技术有限公司，为美国Fermentas公司产品；电泳用琼脂糖为德国Promega公司产品；RULERTM DNA 100 bp ladder产品购自晶美公司；VEGF ELISA试剂盒购自晶美生物公司。VEGF引物由上海博亚生物工程服务有限公司合成，引物序列参见 　　PCR产物琼脂糖凝胶电泳部分结果 　　结果如图1、2所示，HL-60细胞表达VEGF mRNA的3种片段，即516 bp、588 bp和648 bp，分别是3种异构体VEGF121、VEGF145、VEGF165 mRNA的扩增产物，HL-60细胞以VEGF121的表达最强。在同一时间点上随作用药物浓度的升高，VEGF条带与β-actin条带丰度比值下降。 　　讨 论 　　VEGF可以刺激新生血管的产生，通过自分泌和旁分泌途径促进自身的增殖，VEGF可能作为一种旁分泌因子 影响 着白血病细胞自身的生物学效应［4］。大量的临床 研究 证明，VEGF在各类型的白血病细胞中均有高表达，且是影响白血病发生 发展 及预后的独立因素之一，寻找能抗VEGF产生的药物在白血病的 治疗 中就具有十分重要的意义。 DADS是大蒜中一种有效的脂溶性成份，