人AGM区基质细胞对脐血LTC.docVIP

　　人AGM区基质细胞对脐血LTC 【摘要】 为探讨人主动脉-性腺-中肾（AGM）区基质细胞对脐血长期培养启动细胞（LTC-IC）的造血支持作用，建立了人AGM区基质细胞与脐血CD34+细胞体外长期共培养体系。采用免疫磁珠 方法 分离人脐血CD34+细胞，接种于已制备好人AGM区基质细胞（hAGMS1-S5）饲养层的24孔板中共培养，同时设无饲养层组作为对照，分别于共培养5、6、7、8周时收获细胞行造血细胞集落培养，并采用极限稀释法（LDA）检测与人AGM区基质细胞共培养后的脐血CD34＋ 细胞的LTC-IC含量。结果表明，无饲养层的对照组培养5周后不再产生造血细胞集落，而以hAGMS1-S5作为饲养层，共培养5周后造血细胞仍具有集落形成能力。hAGMS1-S5维持LTC-IC的作用组间比较有显著性差异（Plt;0.05），其中以hAGMS3与S4组支持作用最强。LDA检测结果显示，hAGMS3和S4维持LTC-IC的能力无显著性差异（Pgt;0.05）；与hAGMS3和S4共培养14天后脐血CD34＋ 细胞中的LTC-IC扩增，分别是达到(176±46)%、(187±52)%，S3和S4两组间比较无显著性差异（Pgt;0.05）。结论：人AGM区基质细胞S1-S5对脐血LTC-IC具有维持作用，特别是hAGMS3和S4两株细胞对脐血LTC-IC具有更好的维持及扩增作用。 【关键词】 AGM区 　　Supportive Effects of Human Aorta-Gonad-Mesonephros-Derived Stromal Cells on Umbilical Cord blood LTC-IC 　　　Abstract The objective of this study an aorta-gonad-mesonephros(AGM)-derived stromal cells on human umbilical cord blood long-term culture-initiating cells (LTC-IC). A co-culture system an AGM stromal cells and umbilical cord blood CD34+ cells. Different stromal cells derived from human AGM region (hAGM S1-S5) human umbilical cord blood through immunomagic bead selection method，seeded on the feeder cells，and co-cultured for 8 atopoietic cells bilical cord blood CD34+ cells after co-culture al cells iting dilute analysis(LDA). The results shoatopoietic CFC in the feeder cell-free culture system after 5 s，there an AGM stromal cells could maintain LTC-IC in vitro. In groups of hAGM feeders，hAGMS3 and S4 had better supportive effects than other AGM groups (Plt;0.05). The absolute number of LTC-IC in hAGM S3 and S4 culture systems got expansion up to (176±46)% and (187±52)% respectively an AGM stromal cells S1-S5 support the maintenance of umbilical blood LTC-IC in vitro，aintaining LTC-IC and expansion of LTC-IC. 　　Key al cell；LTC-IC；cord blood 　主动脉-性腺-中肾（aorta-gonad-mesonephros，AGM）区是胚胎期永久造血的起源部位，正成为国际上造血发生、分化机理 研究 中的热点。AGM区造血微环境对多能造血干细胞的发生及发育起重要作用。基质细胞是造血微环境的主要成分，通过研究基质细胞的体外造血支持功能是 分析 造血微环境的重要途径。本研究探讨人AGM区基质细胞对人脐血来源的长期培养启动细胞（long-term cultur-initiating cell，LT