反相HPLC测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量.docVIP

　　反相HPLC测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量 【摘要】 目的 建立用高效液相色谱法（HPLC）测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量的 方法 。方法 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶（phenomenex luna 5μm,250mm×4.6mm）；流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾（pH9.0）（60：40）；流速 1.0ml/min，进样量20μl；检测波长 210nm。结果 乳糖酸阿奇霉素在20～100μg/mg范围内浓度与峰面积具良好线性的关系(r=0.9996)，回收率平均值为99.5%，RSD=0.7% ，精密度为RSD = 0.85%。结论 HPLC法简便，快捷，准确，适用于 企业 对中间体含量的控制。 【关键词】 阿奇霉素; 高效液相色谱法 【Abstract】 Objective To build the method of measuring the content of azithromycin lactobionate for injection ance liquid chromatography (HPLC).Methods Chromatographic column is 18-alkyl silicane bonding silicone rubber (phenomenex luna 5μm,250mm×4.6mm),flool/L K2HPO3(pH9.0)(60:40),the flol/min,the inflo.Results The concentration and peak area of azithromycin lactobionate have a good linear relationship (r = 0.9996) g, recovery ratio average is 99.5%,RSD = 0.7%, the precision is RSD = 0.85%.Conclusion HPLC method is simple and convenient, quick and precise, ediate pound. 【Key ycin;high-performance liquid chromatography 乳糖酸阿奇霉素是一种新型的注射用大环内酯类广谱抗生素。其法定含量测定采用微生物测定法［1］，操作繁琐费时。本文 研究 了用反相HPLC测定乳糖酸阿奇霉素的含量，并与微生物法进行了比较。本法简便、快速、准确。 　　1 仪器与试剂 1.1 仪器 高效液相色谱仪（美国enex luna 5μm,250mm×4.6mm），广州菲罗门 科学 仪器公司提供。 2.2 流动相 乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾（pH9.0）（60：40），流速：1.0ml/min，进样量20μl，检测波长：210nm，温度：30， 理论 塔板数：按阿奇霉素 计算 应不低于3000。 2.3 阿奇霉素标准品谱图和乳糖酸阿奇霉素样品谱图 如图1,2,3。 在上述色谱条件下，乳糖酸对阿奇霉素测定无干扰，且乳糖酸和阿奇霉素的分离良好，分离度为2.6；保留时间为8.6min; 理论 塔板数：按阿奇霉素 计算 4600；结果见图1～3。 2.4 样品测定及 方法 比较 取注射用乳糖酸阿奇霉素适量，配制成每1ml含0.06mg的溶液。按2.2色谱条件在高效液相色谱仪上进样，记录色谱图用外标法计算含量测定结果见表1，同时与微生物法进行含量测定两种方法的比较见表1。 表1 样品测定结果 3 结果与结论 3.1 工作曲线与线性范围 精密称取阿奇霉素标准品约50mg，置25ml容量瓶中，以流动相溶解并稀释制成每1ml含阿奇霉素0.02mg、0.04mg、0.06mg、0.08mg、0.10mg的标准品溶液系列，分别在高效液相色谱仪进样20μl，以标准品峰面积与浓度做回归方程：Y=0.3692X-0.1526， r=0.9996（n＝5）。结果表明阿奇霉素在20～100μg/mg范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。 3.2 回收率试验 按处方工艺精密量取不加阿奇霉素的乳糖酸溶液适量，分别精密加入阿奇霉素原料240mg，以次制备5份取上述0.06mg的溶液，作为对照品溶液，在高效液相色谱仪上测定峰面积，以外标法计算含量，得回收率平均值为99.5%，RSD为0.79%。 3.3 精密度试验 取每1ml含0.06mg的阿奇霉素标准品溶液，连续进样10次，得峰面积的RSD为0.85%。 4 讨论 注射用乳糖酸阿奇霉素是冻干粉针剂，中间体含量控制采用微生物测定法实验周期太长，约24h，不利于半成品的保存，采用高效液相色谱法15min即可分离测定完毕。由测定结果可知，高效液相色谱法