反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量.docVIP

　　反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量 【摘要】 　　目的建立抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法，色谱柱为Nova-Pak C18(150 mm×3.9 mm，4 μm)，流速0.8 ml·ml-1，乙腈∶水（20∶80）为流动相，检测波长为320 nm。结果葛根素的线性范围为0.3056～1.528 mg·ml-1，r=0.999 7，平均回收率为98.15%，RSD＝1.20%（n=6）；2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围为1.024～8.192 μg·ml-1，r=0.999 5，平均回收率为97.46%，RSD＝2.12%（n=6）。结论该方法简便、快速、准确，适合该胶囊中葛根素和2,3,5,4-四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量测定。 【关键词】 反相高效液相色谱法 葛根素 2,3,5,4 四羟基二苯乙烯 2 Oβ D 葡萄糖苷 　　Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of puerarin and 2,3,5,4-Tetrahydroxy-stibene2OβDglycoside in Kangnaoshuai capsule. MethodsRPHPLC n(4 μm,150 mm×3.9 mm)l·ml-1, the detection . ResultsThe linear range g·ml-1(r=0.999 7)，the average recovery l-1(r=0.999 5)，the average recovery ethod is simple, sensitive, accurate and suitable for the determination of puerarin and 2,3,5,4-Tetrahydroxy-stibene-2-O-β-D-glycoside in Kangnaoshuai capsule. 　　Key 的滤膜过滤。 　　 2 方法和结果 　　2.1 色谱条件 m×150 mm，4 μm），流动相为乙腈∶水（20∶80），流速为0.8 ml·min-1，柱温40℃，检测波长320 nm。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品15.28mg置5 ml量瓶中，加30%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为3.056 mg·ml-1的葛根素对照品溶液；精密称取2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品5.12 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为0.0512 mg·ml-1的2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液。 　　2.2.2 样品溶液的制备 取抗脑衰胶囊20粒,倾取内容物，研细，精密称取细粉1.0 g，置干燥锥形瓶中，加入甲醇适量，超声30 min，室温下过滤，滤液置80℃水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10 ml，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.2.3 阴性样品溶液制备 按处方配制不含葛根、何首乌的阴性样品，按“2.2.2”项操作方法制备阴性样品溶液。 　　2.3 干扰性实验 取葛根素对照品溶液、2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液各5μl，在上述色谱条件下进样测定。结果见图1。由图1可知样品中的其他组分不干扰葛根素和2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的测定。 　　2.4 线性关系实验 　　2.4.1 葛根素 分别精密吸取葛根素对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，分别置于2 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件，依次进样10 μl，测定峰面积，将所得峰面积与进样量进行线性回归，回归方程为Y=2.188×107X-1.191×106(r=0.999 7)。结果表明葛根素在0.305 6～1.528 mg·ml-1范围内线性关系良好。 　　图1 抗脑衰胶囊高效液相色谱图（略） 　　2.4.2 2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 分别精密吸取2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml置25 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件，依次进样10 μl，测定峰面积，将所得峰面