反相高效液相色谱法测定丹参妇康胶囊中芍药苷的含量.docVIP

　　反相高效液相色谱法测定丹参妇康胶囊中芍药苷的含量 【摘要】 　　目的建立测定丹参妇康胶囊中芍药苷含量的方法。方法色谱柱Reliasil C18（5 μm,250 mm×4.6 mm），保护柱(5μm,12.50 mm × 4.6 mm)，以乙腈-0.02 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（26∶74）为流动相，检测波长为230 nm, 柱温30℃， 流速为1.0 ml·min-1。结果芍药苷在0.496～29.76 μg·ml-1 线性范围与色谱峰的峰面积积分值呈良好的线性关系，r=0.999 5；芍药苷平均回收率98.82 %，RSD=2.11%。结论该方法简便，分离完全，结果可靠，能够有效控制该制剂的质量。 【关键词】 芍药苷 丹参妇康胶囊 反相高效液相色谱 　　Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of paeoniflori in Fukang capsules. MethodsAnalytical column: Reliasil C18（5μm,250 mm×4.6 mm）, protective column：（5 μm,12.50 mm×4.6 mm) ; mobile phrase: acetonitrile-0.02mol·L-1phosphate buffer (26∶74)； detective ; temperature l·min-1. ResultsThe standard curve shol-1, r=0.999 5. The average recovery ethod is feasible and simple to operate, and it is suitable for the quality control of Fukang capsules. 　　Key ,250 mm×4.6 mm）,保护柱： (5 μm,12.50 mm×4.6 mm);流动相：乙腈-0.02 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（26∶74）；检测波长230 nm; 柱温30℃；流速：1.0 ml·min-1；进样量10 μl；芍药苷保留时间为10 min左右。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　取中药颗粒约2 g，精密称定，置索式提取器中［3］，加50 ml乙醇提取1 h，将乙醇挥干后，加流动相于残渣中并定量转移到25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，用0.45 μm 微滤膜过滤，量取1 ml置于塑料离心管中，离心(8 000 r/min，4 min)，取上清液，作为供试品溶液。 　　2.3 阴性对照液的测定 　　取不含赤芍处方同法制备的阴性样品，按样品测定项下方法制备阴性溶液。 　　2.4 芍药苷标准曲线的制备 　　取干燥至恒重的芍药苷对照品约12 mg，精密称定，置100 ml棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得对照品储备液。精密吸取芍药苷对照品储备液0.04，0.12，0.36，1.2，2.4 ml，分别置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取10 μl，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定峰面积，将进样浓度（X）与峰面积（Y）进行回归处理，回归方程为：Y=116 848.53X+592.90,r=0.999 5。实验表明，芍药苷对照品在0.496～29.76 μg·ml-1范围内具有良好的线性关系。 　　2.5 精密度实验 　　精密吸取对照品溶液、同一供试液各10 μl ，重复进样5次，测定峰面积， 计算 相对标准偏差。 结果对照品平均RSD为0.41%，供试品平均RSD为2.84%。 　　2.6 重现性实验 　　取样品适量粉碎，精密称取5份，每份1 g，按“2.2”项下制备供试液，上述色谱条件测定，结果：芍药苷含量的平均RSD为3.36%。 　　2.7 稳定性实验 　　取同一份芍药苷对照品溶液，分别室温放置不同时间测定，结果表明，样品至少在12 h内稳定。 　　2.8 加样回收率的实验 　　取本品（040307）5份各1 g，精密称定，置50 ml索式提取器中，加入芍药苷对照品，按“2.2”项下制备供试液，依法测定，结果芍药苷平均回收率：98.82%，RSD为2.11%（n=5）。 　　2.9 方法可行性考察 　　分别取芍药苷对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液，在上述色谱条件下测绘HPLC图谱，结果见图1。由图1可知，阴性样品溶液对测定无干扰，芍药苷与其他组分分离良好，方法可行。 　　2.10 样品的测定 　　样品按2.2项下处理后，按上述色谱条件测定样品3批次，每批次取3个样品。精密吸取供试品液10 μl，结果芍药苷平均含量为1.167 mg·g-1。 　　 3 讨论