多种化疗药对凋亡抑制蛋白Survivin在HL.docVIP

　　多种化疗药对凋亡抑制蛋白Survivin在HL 作者：吴耀辉，邹萍，刘芳，张敏，陈建华 【摘要】 Survivin基因是细胞凋亡抑制蛋白家族的新成员，由于其具有在人类正常组织不表达而在各种肿瘤组织高表达的特性，因此有望成为肿瘤 治疗 的选择性靶点；有 研究 还表明survivin的表达与耐药性的发生有关。本研究旨在通过查明HL-60细胞在多种化疗药物作用后mRNA和蛋白的改变，初步探讨survivin和耐药性之间的关系。用合适浓度的柔红霉素(DNR)、米托蒽醌(MIT)和三氧化二砷(As2O3)作用于HL-60细胞，随后用RT-PCR检测给药的第1天和第3天HL-60细胞中survivin mRNA的表达情况，用IT组下降40%(Plt;0.01)，As2O3组下降了25%(Plt;0.01)。在给予化疗药的第3天，DNR和MIT组的HL-60细胞中survivin mRNA表达较第1天有明显的升高，分别上升20%(Plt;0.05)和65%(Plt;0.01)；但给予As2O3组中的survivin mRNA表达仍持续降低，仅为第1天的68%(Plt;0.01)。IT 3天后的HL-60细胞中survivin蛋白含量分别升高了14%和11%，而给予As2O3组则下降了82%。结论：在给予化疗药后白血病细胞survivin表达先降低后升高的现象可能与化疗中耐药性的发生有关，而三氧化二砷有着不同的作用机制，这在逆转耐药性上可能发挥重要的作用。 【关键词】 柔红霉素 　　Alteration of Expression of Survivin in HL-60 Cells Treated otherapeutic Drugs 　　Abstract Survivin，a neember of the inhibitor of apoptosis protEin (IAP) family，expressed in the most human cancers but not in terminally differentiated adult tissues，so survivin may be a target for tumor therapy.In addition，some scholars found that survivin expression is associated otherapy. To explore the relationship betRNA and protEIn of HL-60 cells treated ycin (DNR)，mitoxantrone (MIT) and arsenic trioxide (As2O3) RNA and survivin protein RNA levels all decreased after the first day of treatment RNA treated ent otherapeutic drugs，the survivin level descended at first day and then ascended obviously.This phenomenon may be associated otherapy for leukemia.On the other hand，As2O3 shoechanism that may play a significant role to reverse resistance. 　　Key ycin; mitoxantrone; arsenic trioxide; survivin; HL-60 cell 　　细胞凋亡受阻在肿瘤的发生、 发展 及肿瘤化疗耐药等方面占有重要的地位。近年来的研究表明，细胞凋亡调节的改变可能是肿瘤化疗耐药发生的原因之一［1］。Survivin作为细胞凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)家族的新成员，由于其具有在人类正常组织不表达，而在人类各种肿瘤组织高表达的特性［2］，有望成为肿瘤治疗的选择性靶点，引起了学者们的广泛关注。化疗在 目前 仍然是治疗白血病的主要 方法 ，但日益增多的耐药性的出现严重 影响 了治疗的疗效，而耐药性发生机制目前尚不十分清楚。我们通过研究多种化疗药物作用人急性髓性白血病细胞系HL-60后survivin mRNA和蛋白的变化，初步探讨survivin和化疗耐药性之间的关系。 　　材料和方法 　　材料与试剂 　　RPMI 1640培养液、新生牛血清、TRIZOL试剂购自Gibco公司，MMLV逆转录酶、RNA抑制物为Promega公司产品，DNA聚合酶购自日本TaKaRa公司，兔抗人s