高中生物 专题3 植物的组织培养技术 课题3 菊花的组织培养课件 新人教版选修1.pptVIP

专题3 植物的组织培养技术 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。 植物组织培养：在人工培养基，把离体植物的器官、组织或细胞，培养并成完整植株的技术。 课题1 菊花的组织培养 课题背景 科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而 处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用 下，就可能表现出全能性，发育成完整植株。 在本课题中，我们将通过菊花组织培养的实验来学习这一技术。 课题目标 1.说明植物组织培养的基本原理 2.学习植物组织培养的基本技术 3.进行菊花或其他植物的组织培养 (一)植物的组织培养的基本过程 一、基础知识 1.植物组织培养的原理 生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。 （1）细胞分化： 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 根本原因： 在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。 （2）细胞全能性： 离体、营养物质、激素和其他外界条件。 植物细胞表现全能性条件： 2.植物组织培养的基本过程 2.植物组织培养的基本过程 外植体： 离体的植物器官或组织片段。 脱分化（去分化）： 高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 愈伤组织： 通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 再分化： 愈伤组织继续进行培养重新分化成根或芽等器官的过程。 愈伤组织： 丛芽 （二）影响植物组织培养的因素 1.外植体的选取 ① 不同植物的组织培养难度 例如：烟草和胡萝卜的组织培养较容易，枸杞愈伤组织的芽诱导较难。 ②同一植物材料、材料的年龄、保存时间的长短 例如：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 2.培养基的配制(MS培养基) 大量元素： N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素： B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物： 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素： 生长素、细胞分裂素、赤霉素等 一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等； 保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养基以有机营养为主。MS培养基则需提供大量无机营养。 3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量 使用顺序 实验结果 先生长素，后细胞分裂素 有利于分裂，不利分化 先细胞分裂素后生长素 既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 生长素细胞分裂素比值 结果 高 促根分化， 抑芽形成 低 促芽分化， 抑根形成 适中 促进愈伤组织生长 菊花组织培养的条件：pH=5.8 、温度、控制在18—22℃、每日光照12h pH、温度、光照等条件也很重要。 4. 环境条件 5.消毒和灭菌 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境，是成功的关键。 【小结】植物组织培养过程: 离体组织或细胞 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 植物体 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 在菊花的组织培养操作完成了3～4天后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是（ ） A．接种时培养基灭菌不彻底 B．接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 C．愈伤组织形成初期没有给予充足的光照 D．培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例 【典型例题】 C 【方法点拨】 1.愈伤组织形成过程中，细胞还没有开始再分化，没有叶绿素和叶绿体的形成，不可能进行光合作用，因此愈伤组织形成初期不需要充足的光照。 2.培养的不同阶段，对主要营养物质和激素的需求不同，所以培养过程中要及时调整各种营养物质、激素的比例。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培养 栽培 移栽 二、实验操作 （一） 制备MS培养基 1.配制各种母液 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存。 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。 2.配置培养基 添加各种成分→定容→调pH→分装 （成分添加顺序：蒸馏水→琼脂→蔗糖→大量元素→微量元素→有机物→植物激素） 注意：菊花的茎段的组织培养比较容易，不必添加植物