miR-143在鼻咽癌细胞系中的表达及其对高转移细胞株5-8F的影响.pdfVIP

.582. doi 10.3969/j.issn.1673-4254.2013.04.26 J South Med Univ, 2013 , 33(4): 582-585 基础研究 miR-143 在鼻阻癌细胞系申的表达及真对高转移细胞株5-汩的 影响 钟文l ，何本夫2 ，全天-3，朱成全4 ，周忠、朗 2 ，陈永乐 2 解放军第四二一医院1 体检中心，2 肿瘤手中，4 中西医结合科，广东广州 510318 ;3 广州医学院第三附属医院肿瘤 手中，广东广州 510150 摘要:目的检测鼻咽癌细胞系中miR-143表达情况，建立稳定高表达miR-143 的鼻咽癌细胞系，为研究其在鼻咽癌的发生和发展 中的作用机制提供可靠的细胞模型。方法采用QPCR方法检测鼻咽癌细胞系CENl、 CNE2、 HONEU-8F、 6-10B及人永生化鼻 咽上皮细胞NP69 中miR-143 的表达水平。构建重组逆转录病毒质粒pMSCV-puro-miR-143 ，包装逆转录病毒pMSCV-miR-143 和pMSCV-Vector并感染鼻咽癌细胞，建立稳定高表达miR-143 的鼻咽癌细胞系，并应用细胞翁附实验检测过表达mir-143后，鼻 咽癌细胞对胞外基质的教附性。结果鼻咽癌细胞系中miR-143 的表达水平均低于对照组NP69细胞，其中高转移潜能细胞株 5-町的表达量最低，仅为对照组的3.03%，成瘤但不转移细胞株6-10B表达量最高，为对照组的63.59%。实时荧光定量PCR显示 筛选后第7代细胞miR-143 的表达水平比对照组高出达1080倍(P0.05)。细胞站附实验结果显示，过表达mir-143 可降低5-8F细 胞对胞外基质的教附险。结论 miR-143 在鼻咽癌细胞系中表达失常，其作用可能与鼻咽癌细胞的侵袭和转移相关;成功建立了 稳定高表达miR-143 的鼻咽癌细胞系，并初步确定miR-143 能抑制5-8F细胞的秸附能力，为探索miR-143 在鼻咽癌的发生和发展 中的作用机制奠定了实验基础。 关键词:miR-143;鼻咽癌;逆转录病毒;稳定细胞系;蒙古附 Expression of miR-143 in nasopharyngeal carcinoma cell lines and its effect on cell adhesion ability 3 ZHONG Wen, HE Benfu, QUAN刀anyi ， ZHU Chengquan, ZHOU Silang, CHEN Yongle Medical Examination Center, Department of Oncology, Department of lntegrated Chinese and Western Medicine, 421 Hospital of PLA, Guangzhou 510318, China;3Department ofOncology, Third Affiliated Hospital ofGuangzhou Medical University, Guangzhou 510150, China Abstract: Objective To detect miR-143 expression in human nasopharyngeal carcinnoma (NPC) celllines and explore the role of miR-143 in regula由19 the adhesion ability of NPC cells. Me世lods Fluorescence quantita咀ve RT-PCR was used to detect miR-143 expression levels in 5 NPC cell lines (CEN1, CNE2, HONE1 , 5-8F, and 6-10B) and an immortalized human nasopha巧mgeal epithelial cellline (NP69).ηle retrovirus plasmid pMSCV-puro-miR-143 was constructed