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【课堂新坐标】(教师用书)高中生物 第4章 生物化学与分子生物学技术实践同步备课参考 苏教版选修1
第一节生物成分的分离与测定技术
(教师用书独具)
●课标要求
1.结合离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的知识掌握其方法原理和方法要领。
2.结合蒸馏、电泳等相关知识掌握其原理和操作流程。
3.结合提取橘皮中芳香油的知识掌握利用蒸馏法提取橘皮中的芳香油。
●课标解读
1.掌握分离与测定生物成分中蛋白质的技术。
2.掌握采用醋酸纤维薄膜电泳的方法分离并纯化蛋白质。
3.掌握采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法提取脂肪成分。
●教学地位
本节内容系统介绍了离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质、蒸馏、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳、提取橘皮中的芳香油等知识,是本章的核心内容之一,是高考中的常考内容。
●教法指导
1.可利用多媒体动画展示离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的过程。
2.可充分创造实验条件让学生提取橘皮中的芳香油。
(教师用书独具)
●新课导入建议
可通过展示相关图片,创设问题情景导入本课。
●教学流程设计
学生课前预习:阅读教材P64-72,填写【课前自主导学】,完成“思考交流1、2”。步骤1:情景导课:以【新课导入建议】引出本章和本节课题。步骤2:根据创设的情景,通过【课堂互动探究】探究1分析、理解蛋白质分子在凝胶中的运动情况。通过例1巩固、提高。步骤3:结合凝胶色谱的原理过渡至醋酸纤维薄膜电泳的教学。
步骤7:回扣基础知识,将检查、批阅【课前自主导学】时学生出错较多的部分进行强化,重点对【正误判断】部分进行辨析。步骤6:通过【课堂互动探究】探究3帮助学生认识植物芳香油提取的三种提取方法,利用例3验收、巩固。步骤5:结合芳香油的理化性质过渡至植物芳香油的提取的教学。步骤4:通过【课堂互动探究】探究2帮助学生认识醋酸纤维薄膜电泳。利用例2验收、巩固。
步骤8:引导学生通过合作,整理本课题的重点、难点内容,利用【本课知识小结】进行总结,建立知识网络。理解并记忆【结论语句】。步骤9:通过【当堂双基达标】进行当堂检测验收。
课 标 解 读 重 点 难 点 1.掌握分离与测定生物成分中蛋白质的技术。 2.掌握采用醋酸纤维薄膜电泳的方法分离并纯化蛋白质。 3.掌握采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法提取脂肪成分。 1.离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质。(重难点) 2.凝胶色谱法分离蛋白质。(重点) 3.利用蒸馏法提取橘皮中的芳香油。(重难点)
离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质 1.细胞中蛋白质的释放
在提取蛋白质时,可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎,使蛋白质从细胞中释放出来,并使其溶解在适当的抽提液中。
2.抽提液的选择
要根据蛋白质的特性而定,一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提,碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提,脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。
3.离心沉降法分离蛋白质
通过控制离心速度,使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层,从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。
4.薄膜透析法分离蛋白质
利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性,使蛋白质与其他小分子化合物分离开的纯化蛋白质的方法。
凝胶色谱法分离蛋白质 1.凝胶色谱法的概念
是根据蛋白质分子的大小,对其进行有效分离的方法。
2.凝胶
(1)组成:由胶体溶液凝结而成的固体物质。
(2)成分:由葡聚糖、琼脂糖等多糖类化合物。
(3)结构:小球体内部具有很细微的多孔网状结构。
3.分离蛋白质的原理
①大分子蛋白质不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙移动,洗脱路程较短,移动速度较快,最先流出柱外。
②小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构,洗脱路程较长,移动速度缓慢,以致较长时间流出柱外。
蒸馏 1.蒸馏的概念
将液体加热至沸腾,使液体变为蒸气,然后使蒸气冷却再凝结为液体,这两个过程联合操作称为蒸馏。
2.蒸馏分离物质的原理
蒸馏可以将易挥发和不易挥发的物质分离开来,也可将液体混合物中沸点不同的物质分离开来。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验步骤 操作方法 平悬薄膜 将点样端平贴在电泳槽负极支架的“滤纸桥”上,有记号的一面朝上,另一端平贴于正极,呈绷直状态 实施电泳 盖上电泳槽盖,电泳60~90 min 染色 取下薄膜,放入染色液中浸泡5~10 min 漂洗 取出薄膜,在漂洗液中漂洗数次,直至蛋白质区底色脱净为止 脱色 用滤纸压平并吸干薄膜后,再浸入透明液中约5 min,取出后平贴于玻璃板上,待完全干燥后便成透明膜图谱,可长期保存 提取橘皮中的芳香油 1.橘皮芳香油具有诱人的橘香味,其主要成分是柠檬烯。
2.水蒸气蒸馏法
(1)适用范围:适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏的物质成分的提取。
(2)操作步骤
将橘皮切碎与适量的水放入蒸馏瓶―→点燃酒精灯,实施蒸馏―→用锥形瓶收集液体―→用分液漏斗分离芳
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