微生物遗传育种学复习.docVIP

1、工业微生物：大规模培养条件下，批量获得微生物细胞或其代谢产物过程中所使用的微生物菌株；或利用微生物特定代谢过程，规模化加工或转化特定底物或环境物料的微生物菌株。 简言之，工业微生物就是应用于发酵工业的微生物。 工业微生物的应用工业微生物的特点①纯种，非致病性，遗传上稳定（利于保藏）；②对诱变剂敏感（诱变率高，便于筛选新的基因型）；③容易产生繁殖体且生长迅速（生长周期短，抵抗杂菌）；④适合大规模培养，产生目标产物的时间短，且容易分离提纯（生产成本低）。 4、工业微生物筛选流程 5、微生物遗传育种技术突变泛指细胞内（或病毒颗粒内）遗传物质的分子结构或数量突然发生的可遗传的变化。 携带有突变（mutation）的生物个体或群体称为突变体（mutant）。 突变体的基因型或表现型就称为突变型。 相应的没有发生突变的基因型或表现型称为野生型（wild type） 。 并不是所有自然界的天然表型都是野生型。 E.coli中的lac基因，各种抗生素的抗性等 野生型是指生物的正性状，例如分解某种底物的能力，能够合成某种物质的能力。 9、基因突变的规律：①自发性：突变可以在没有人为诱变因素处理下自发地产生；②不对应性：突变的性状与突变原因之间无直接的对应关系；③稀有性：突变率低且稳定，通常自发突变的频率在10-6 ~ 10-9间；④独立性：各种突变独立发生，不会互相影响；⑤可诱发性：自发突变的频率可以通过某些理化因素的处理而大为提高；⑥稳定性：变异性状稳定可遗传；⑦可逆性：从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突变（forward mutation），从突变株回到野生型的过程则称为回复突变或回变（back mutation或reverse mutation）。 10、突变体的形成需经过三个阶段：①诱变剂与DNA接触之前 诱变剂→扩散→与细胞充分接触→穿过细胞膜→进入细胞→穿过细胞质→到达核质体，接触DNA→诱发突变 ②突变发生 DNA损伤：由诱变剂所造成的DNA分子某一位置的损伤或者泛指任何不正常的DNA分子结构，也叫前突变。 非标准碱基的插入，碱基的丢失、烷基化、羟化，嘧啶二聚体的形成，链的断裂、交联等等。 不同的诱变剂所造成的损伤不同，同一种诱变剂也可能造成多种类型的损伤，同一种类型的损伤也可能来自不同的因子。 诱变剂与损伤无一一对应的关系。 ③突变体形成DNA损伤被修复，回复正常，突变不发生； DNA损伤进行倾向差错修复，发生突变。 11、诱变育种：用物理和化学等因素人为地对出发菌株进行诱变处理，然后运用合理的筛选称许及适当的筛选方法把符合要求的优良变异菌株筛选出来的育种方法。 诱变育种的程序：诱变→筛选→再诱变→再筛选 高产菌株诱变育种的特点：产量是一种数量性状，其变化有连续分布的趋势；多基因控制，每个基因所起作用有限；环境对产量影响很大。 12、数量性状的特性和基因突变的特点决定了高产菌株的诱变选育一般具有以下一些特点： ①盲目性大；②筛选工作繁琐，工作量大；③工作效率低，周期长；④难以集合多个优良性状。 13、诱变育种方案的设计：①制定明确的选育目标：一次诱变目标不可太高太多 ； ②建立可行的筛选方法：关键问题是确立一种测定产物的方法 ； ③确定诱变筛选流程：是诱变育种工作方案设计的中心内容。对于既往诱变史较少的低产菌株，采用一次高效法有利于提高育种工作的进度；而对于已进行多次诱变处理的高产菌株，多步积累法优于一次高效法。 诱变育种一般步骤：出发菌株 活化、前培养（同步培养） 培养液 离心收集细胞、洗涤，制备均一的菌悬液 单细胞或单孢子悬液 活菌计数 诱变处理 活细胞计数，致死率计算 后培养 稀释涂布平板 观察菌落形态，统计形态变异率 平板预筛 摇瓶初筛→复筛→ 保藏及扩大试验 筛选的一般步骤：1株出发菌株 诱变处理 400个单细胞菌株 初筛每注一瓶80株 复筛每株三瓶16株 复筛，三种工艺条件，每株各三瓶3株（对应于不同工艺条件） 供生产或再次诱变使用 14、 杂交育种的优点：①两个具有不同优良性状的亲本菌株杂交重组，使两个亲本的优良性状集中于一个重组菌株内；②克服由于长期诱变造成的生活力下降、代谢缓慢等缺点，提高对诱变剂的敏感性；③有助于遗传物质的转移和传递。 细菌、放线菌——接合 真菌——有性生殖或准性生殖 有性生殖：生殖细胞融合 准性生殖：体细胞融合 15、细菌的杂交育种： 亲本的选择：不同的遗传特性，选择性标记或非选择性标记。 细菌的接合：大部分需要F因子 16、F因子的特性： ①F因子可以转移 ；②F因子可自发