药用真菌杨树菇SUMO基因及抗肿瘤活性初步鉴定.docVIP

Medical Diagnosis 医学诊断, 2012, 2, 12-15 /10.12677/md.2012.22003 Published Online June 2012 (/journal/md) The Molecular Cloning and Antitumor Activity Characterization of SUMO from Medicinal Fungus Agrocybe aegerita Yi Liang , Juan Bai , Hui Sun 1 2 3 1 2 3 Department of Clinical Immunology, Guangdong Medical College, Dongguan Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou The College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan Email: liangyi@ Received: May 18th, 2012; revised: May 25th, 2012; accepted: Jun. 10th, 2012 Abstract: Objective: The antitumor-associated gene of Agrocybe aegerita was cloned to identify the bioactivity. Method: cDNA library was constructed and the gene SUMO was obtained by random sequencing. The eukaryotic ex- pression vector was constructed to detect cell apoptosis and senescence activity. Result: The gene of SUMO was cloned with 606 bp and 103 amino acid residues. The expression in HeLa cells could induce the cell apoptosis instead of se- nescence. Conclusion: SUMO from medicinal fungus worth to be investigated for the discovery of new antitumor medicine. Keywords: Medicinal Fungus; SUMO; Antitumor Activity; Apoptosis 药用真菌杨树菇 SUMO基因及抗肿瘤活性初步鉴定 梁 一，白娟，孙慧 3 1 2 1 2 3 广东医学院检验学院，临床免疫教研室，东莞 河南中医学院，郑州 武汉大学生命科学学院，武汉 Email: dianerliu@ 收稿日期：2012年 5月 18日；修回日期：2012年 5月 25日；录用日期：2012年 6月 10日 摘 要：目的：克隆杨树菇抗肿瘤相关蛋白基因，初步鉴定其活性。方法：构建 cDNA文库，随机测序得到 SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier)基因，通过构建真核表达质粒，并检测其在 HeLa细胞中表达引起的细胞凋亡及衰 老的变化，初步鉴定其抗肿瘤活性。结果：得到全长为 606 bp的 SUMO cDNA序列，编码 103个氨基酸，将表 达 SUMO的真核表达质粒转染入 HeLa细胞中，发现可引起肿瘤细胞的凋亡，但对细胞衰老无影响。结论：药 用真菌中 SUMO等小泛素类蛋白酶系统值得进一步研究，有助于新型抗肿瘤药物前体的开发。 关键词：药用真菌；SUMO；抗肿瘤；凋亡 1.引言 已有十多种药用真菌蛋白被报道具很强的抗肿瘤活 性(nM 级)[5,6] ，提示除多糖外，蛋白质是药用真菌中 药用真菌因其独特的药理活性被越来越多的研 [ 7] 究者关注[1-3]。其中蛋白质组分占子实体干重约 10%~ 另一类重要的抗肿瘤活性组分 。本文通过构建 cDNA 文库测序的方法，克隆到药用真菌杨树菇 Agrocybe aegerita 小泛素样修饰物(Small Ubiquitin- 40