2015—2016学年人教版选修一微生物的实验室培养学案.doc

专题2 微生物的分离与培养 课题1 微生物的实验室培养 导学案 编写：韩志涛 审核：詹 翔 【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作 【课题重点】无菌技术的操作 【课题难点】无菌技术的操作 【知识链接】 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。可分为 培养基和 培养基。 2．营养构成：各种培养基一般都含有 、 、 和 ，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。 〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？ 二、无菌技术 (一)获得纯净培养物的关键是 ，具体操作如下： 1．对实验操作的 、操作者的 和 进行 。 2．将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。 3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。 4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (二)消毒和灭菌 1．消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。 2．灭菌是指 。常用的方法有： 、 、 灭菌。分别适用于那些用具？ 〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？ 〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？ 〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是 ；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 ，温度为 ，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至 时打开锅盖，其目的是防止 。 三、实验操作----大肠杆菌的纯化培养： （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是 、 、 、 、 。 〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？ 2、倒平板：待培养基冷却至 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是： ①在火焰旁右手拿 ，左手 ； ②使锥形瓶的瓶口 ； ③左手将培养皿 ，右手 ，立刻盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后，将平板 。 〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？ 〖思考8〗平板倒置的目的是什么？ 〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ 〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？ （二）纯化大肠杆菌 微生物接种：最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。 1、平板划线法是 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是： ①将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。 ②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的