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2016-2017学年人教版选修1分解纤维素的微生物的分离课件(47张).ppt
* 专题2 微生物的培养与应用 课题3 分解纤维素的微生物的分离 操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 先培养微生物,再加入刚果红 方法一 缺点 优点 操作 方法 ①由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现透明圈较为模糊的假阳性反应;②有些微生物具有降解色素的能力,长时间培养会降解刚果红而形成明显的透明圈 操作简便,不存在菌落混杂的问题 倒平板时加入刚果红 方法二 * [目标导航] 1.了解纤维素酶的种类及作用。2.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。知识梳理一、纤维素与纤维素酶纤维素的化学组成。含C、H、O三种元素是一种多糖。纤维素的基本组成单位是葡萄糖人体内没有纤维素酶所以人体不能直接以纤维素为能源物质但土壤中有分解纤维素的微生物最葡萄糖释放到无机环境。2.纤维素的分布。棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物此外木材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素产生于植物的光合作用地球上的植物每年产生的纤维素超过亿吨。研究土壤中分解纤维素的微生物将给我们的生活带来很大变化。3.纤维素酶的组分。纤维素酶是一种复合酶一般认为它至少包括C酶、酶和葡萄糖苷酶三种组分。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。二、纤维素分解菌的筛选方法。刚果红染色法常用的有两种一种是先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应另一种是在倒平板时就2.原理。(1)含纤维素的培养基中加入的刚果红可与纤维素形成红色复合。(2)当纤维素被纤维素酶分解后形成的纤维二糖、葡萄糖不和刚果红发生这种反应红色复合物就无法形成培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。三、实验设计实验流程。土壤取样→选择培养(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。土壤取样。采取土样时可以选择富含纤维素的环境。3.选择培养。(1)目的:增加纤维素分解菌的浓度确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。(2)操作方法:将土样30 mL选择培养基的锥形瓶中将锥形瓶固定在摇床上在一定温度下振荡培养~2 d直至培养液变混浊也可重复选择培养。4.涉及的生物技术。主要有:培养基的制作、无菌操作技术、稀释涂布平板法、选择培养基的作用、土壤取样等。预习反馈判断正误1)葡萄糖苷酶将纤维素分解成纤维二糖。(×)(2)刚果红可以与纤维素形成红色复合物。(√)(3)透明圈就是刚果红与纤维素形成复合物的结果。(×)(4)采集土样时可以选择纤维素丰富的环境。(√)(5)纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。(√)要点一 刚果红染色法1.筛选纤维素分解菌时利用刚果红染色法会出现漂亮的透明圈你知道透明圈是怎么出现的吗? 常用的刚果红染色法有两种你知道这两种方法有什么不同吗? 归纳提升实验原理(1)
(2)
2.目的:通过颜色反应直接筛选微生物。方法与比较
两种刚果红染色法都会出现透明圈关键是加入刚果红的时间是不同的。典例研析【例1】 下列有关刚果红染色法的叙述不正确的是( )刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红可以在菌落形成后加入刚果红在菌落形成前倒平板时加入加入的刚果红不需要灭菌D.在菌落形成后加入刚果红时刚果红不需要灭菌解析:本题考查刚果红染色法的原理和应用。刚果红可以在细菌菌落形答案:C刚果红染色法的原理刚果红染色法是鉴定纤维素分解菌的一种方法其原理是刚果红与纤维素结合形成红色复合物当纤维素分解菌存在时产生分解纤维素的酶使培养基中纤维素分解红色褪去形成透明圈。即时演练在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是( )分解尿素的细菌 B.硝化细菌分解纤维素的细菌 D.乳酸菌解析:分解纤维素的细菌能将纤维素分解刚果红—纤维素的复合物就无法形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。答案:C2.鉴定纤维素分解菌时可以使用刚果红对其染色刚果红染色法有两种常用方法两种( )均会出现透明圈方法一出现方法二不出现均不会出现透明圈方法一不出现方法二出现解析:两种刚果红染色法染色的时间不同但结果一样均出现透明圈。答案:A要点二 分离分解纤维素的微生物的实验设计1.分离分解纤维素的微生物与分离分解尿素的细菌所用的培养基有什么不同? 实验时你会怎样设计实验流程?要注意什么? 归纳提升土壤取样在富含纤维素、潮湿的土壤中用无菌小铁铲铲去表层土迅速铲取土壤并装入2.选择培养(1)具体操作。(2)设置对照。将上述
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