2016-2017学年人教版选修1酵母细胞的固定化课件(28张）.ppt

清溪中学 陈华毅 课题3: 酵母细胞的固定化 专题四 一、课题目标 2．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 1．说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 基础知识 （一）固定化酶的应用实例 1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例 （1）高果糖浆的生产需要 酶 葡萄糖异构 （2）葡萄糖异构酶的优点 稳定性好、可以持续发挥作用 （3）在生产中直接使用酶有什么缺点？ 酶溶解于葡萄糖溶液后，无法回收，造成浪费 2.固定化酶的反应柱示意图 3.固定化酶在生产实践中的优点 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。 （二）固定化细胞技术 1.将酶或细胞固定化的方法 将酶（或细胞）包埋在细微网格里 将酶（或细胞）相互连接起来 将酶（或细胞）吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 吸附法 2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 联系：应用相同，都能催化某些反应 区别 1）固定化细胞技术操作容易，成本低，容易回收； 2）固定化细胞技术对酶活性影响更小； 3）固定化细胞固定的一系列酶； 4）由于大分子难以通过细胞膜，因此固定化细胞的应用有一定的限制； 3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等， 其共同的特点是不溶于水的多孔性载体 （一）制备固定化酵母细胞 实验操作 1、酵母细胞的活化 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2 3、配制海藻酸钠的溶液 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5、固定化酵母细胞 （二）用固定化酵母细胞发酵 实验操作 1、将固定化的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2到3次。 2、将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25摄氏度下发酵24h。 在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.5～1 h，教师需要提前做好准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 （一）酵母细胞的活化 实验操作过程中要注意的下列问题 （二）加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，教师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。 （三）刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。 下面是利用固定化酵母细胞发酵生产啤酒的实验过程： 步骤1：酵母细胞的活化。称取lg干酵母置于50mL烧杯中，加l0mL蒸馏水，搅拌，静置1h。 步骤2：配制物质的量浓度为0．05mol／L的氯化钙(CaCl2)溶液。 步骤3：配制海藻酸钠溶液。称取0．7g海藻酸钠置于50mI．烧杯中，加l0mL蒸馏水，由于海藻酸钠在水中溶解速度很慢，所以50mL的烧杯要放在酒精灯上用旺火持续加热，并用玻璃棒搅拌。 步骤4：? 步骤5：固定化酵母细胞。以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的氯化钙(CaCl2)溶液中形成凝胶珠，让凝胶珠在氯化钙(CaCl2)溶液中浸泡30分钟。 步骤6：固定化酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2～3次。 步骤7：将适量的凝胶珠放人500mL锥形瓶中，加300mL已消毒的麦芽汁，封口于25℃下发酵。 (1)步骤4的正确操是： 。 (2)找出上述步骤中的一处错误并改正 (3)步骤6用蒸馏水冲洗2～3次的目的是 (1)在冷却至常温的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母细胞，充分混合后转入注射器 洗去杂质(氯化钙)和杂菌，防止污染 酵母细胞的活化 配制CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞 思考： 1.影响实验成败的关键步骤是 2.如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包 的酵母细胞数目 3.如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明