微生物检验14.pptVIP

* * * * * * * * * * 抵抗力： 对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3个月 对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1：1000升汞1min，100℃1min、60℃10min均可灭菌 对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不敏感 * 三、微生物学检验 分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集： 分泌物 取双份 如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或15%甘油生理盐水保存 * 毒力试验 患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等 直接涂片染色镜检（单染或G 染色+异染颗粒染色） 吕氏血清斜面35℃12～18h 亚碲酸钾BAP、35℃24～48h BAP35℃16-18h 涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色） 观察菌落特点 吕氏血清斜面 生化反应 涂片染色镜检 检验程序 * 直接涂片染色镜检： -- 2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色 镜检——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”——早期诊断 --用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率 * 分离培养： 吕氏血清斜面： 37℃、8～12h →→涂片染色镜检 --检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP： 37℃、24～48h，黑色菌落 BAP： 轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别 * 鉴定： 形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 —鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖 （+）、麦芽糖 （+） 蔗糖 （-） * 毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据） 体外法： 琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定） SPA协同凝集试验 对流电泳 琼脂平板毒力试验-Elek平板 对流免疫电泳 * 体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验 * 第二节 类白喉棒状杆菌 * （二）结膜干燥棒状杆菌（C. xerosis） （三）化脓棒状杆菌（C. pyogenes） （四）溃疡棒状杆菌(C. ulcerans) （五）假结核棒状杆菌（C. pseudotuberculosis） （六）溶血棒状杆菌（C. haemolyticum） （七）杰克群棒状杆菌（C. jeikeium-CDC group JK） （一）假白喉棒状杆菌（C. pseudodiphtheriticum） * 共同特点： --大多不产生外毒素 --菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒 --大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、 外阴、泌尿道和皮肤等处 --条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等 --鉴别——生化反应 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 棒状杆菌属 * 棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属放线菌科。 棒状杆菌属概述 * 棒状杆菌属种类繁多， 主要有： 白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） 假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum） 干燥棒状杆菌（C.xerosis） 化脓棒状杆菌（C.pyogenes） 溃疡棒状杆菌（C.ulcerans） 假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis） 溶血棒状杆菌（C.haemolyticum） J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK） * G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 类白喉棒状杆菌——条件致病菌 * 第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae * 致病物质 (一)白喉外毒素 毒力强，130ng/kg可使人死亡 抗原性强 编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬菌体 一、临床意义 * 作用机制： A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成 作用特点： 毒性作用大，1分子能杀一个细胞 作用于多种细胞，心肌、神经细胞均有毒素受体 肿瘤细胞对此毒素敏感 * （二）索状因子 细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化 （三）K抗原 --细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 --抗吞噬 --有利于细菌在黏膜表面的定植 * 所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病 传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现 细菌------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素 细菌与毒素共同作用引起局部