CD34^+干细胞的分化及其在人工血管内皮化中的应用 - 副本 - 副本 - 副本.pdf

维普资讯 第 33卷 第2期 浙 江 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vol33 No2 2004生 JOURNAlOFZHEJIANG UNIVERSITY (MEDICALSCIENCES) 2004 http：∥WWW．journals．zju．edu．cn／med CD34+干细胞的分化及其在人工血管内皮化中的应用 张鸿坤 ，张 楠!，汪忠镐 ，李 鸣 ，金 炜 ，封 华 (1，浙江大学医学院 附属第一医院血管 外科．浙江 杭,it、f310003；2浙江大学医学院 附属邵逸夫 医院，浙江 杭州 310016) [摘 要] 目的：探讨外周血、骨髓和脐血中CD 一细胞作为人工血管内皮化的种子细胞来源问题。方法：采集犬外 周血和骨髓及人脐血 ．经免疫磁珠分离出内皮细胞祖细胞 ．内皮细胞生长 因子 (VEGF)诱导分化为 内皮细胞并扩 增 ·光镜 、扫描 电镜和免疫细胞化学鉴定；将培养细胞种植于人工血管 ．扫描 电镜观察 。结果：经流式细胞仪测定，分 离后 的细胞 中CD3一细胞：外周血 (26．30±2．42) 、骨髓 (41．84±3．65)％、脐血 (74．62±4．46)％．骨髓和脐血 中 CD3一细胞数量 明显多于外周血 ．且增殖、分化能力强；CD。 细胞培养 2周细胞长满瓶底并达到增殖高峰 ，细胞呈 ”铺路石 ”状排列。Ⅶ因子 ．CD。免疫细胞化学染色均为阳性 ，透射 电镜细胞胞浆 内可见 W—P小体 ；扫描 电镜下 ，内 皮细胞平铺于人工血管表面 ．成单层排列．细胞排列无轴 向性 。结论 ：外周血、骨髓和脐血经免疫磁珠分离系统可分 离出CD3 细胞 ，CD 细胞经 VEGF诱导可定向分化为内皮细胞 。骨髓和脐血 CD3 细胞可作为人工血管 内皮化 的种 子细胞来源 。 [关键词] 干细胞；骨髓：胎血；内皮化；人工血管；骨髓；脐血；外周血 [中图分类号] R338．13 [文献标识码] A [文章编号] 1008—9292(2004)02—0147—04 Induction ofdifferentiationofCD34一cellsinvitroand application inendothelialization ofblood vesselprostheses ZHANGHong—kun，ZHANGNan·WANGZhong—gao．etal(DepartmentofVascularSurgery。7’heFirstAffi— liatedHospital，CollegeofMedi~ine，ZhejiangUnizersity，Hangzhou310003，China) [Abstract] Objective：ToinducedifferentiationofCD4 cellsfromvaryingsourcesintoepithelialcellsforpo— tentialapplicationofbloodvesselprostheses．M ethods：CD34 cellswereisolatedfrom canineperipheralbloodand bonemarrow orhumanumbilicalcordbloodbyanimmunemagneticcellsortingsystem．TheisolatedCD34 cells wereinducedtodifferentiateintoendothelialcellsinaliquidculturewithVEGF．Endothelialcellswereevaluated by immunocytochem istryandtransmissionelectron microscopy．CD34 cellswereseeded on PTFE prostheses， whichwereharvestedandobservedbyelectronmicroscopy．Results：TheaverageisolatedCD34 cellsfrom peri— pheralblood，bonemarrow andumbilicalcordbloo