微波辅助提取野菊花中总黄酮的工艺研究.docVIP

　　微波辅助提取野菊花中总黄酮的工艺研究 【摘要】 目的对微波辅助提取野菊花总黄酮的工艺条件及参数进行优化。方法在单因素实验的基础上, 采用L9(34)正交设计, 以野菊花总黄酮的提取率为指标, 探讨料液比、微波辅助提取时间、乙醇浓度、微波功率对提取率的影响。结果最佳提取工艺参数为: 料液比1∶50，提取时间9 min，乙醇浓度(φ)=60 %，微波功率340 SP-100E 微波提取仪(北京雷明科技有限公司);U3010紫外可见分光光度计(日本日立公司);722型光栅分光光度计(上海精密 科学 仪器有限公司);FZ102微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);HH-6 电子 恒温水浴锅(苏州威尔试验用品有限公司);FA2104电子分析天平(上海天平仪器厂)。 　 　2 方法与结果 　　2.1 标准曲线的制备称取在120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品0.200 0 g，置于100 ml 量瓶中，加乙醇70 ml，置于水浴上微热使溶解，冷却至室温，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10 ml，置于100 ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得0. 2 mg/ml 芦丁对照品溶液。精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 ml，分别置25 ml量瓶中，加乙醇至6 ml，加ρ(NaNO2)=5 %亚硝酸钠溶液1.0 ml，混匀，放置6 min，加ρ[Al(NO3)3]= 10 %硝酸铝溶液1.0 ml，摇匀，放置6 min，加ρ(NaOH)=5 %氢氧化钠试液10.0 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。以乙醇为参比，用1 cm比色皿，于U3010紫外可见分光光度计上，在400～600 nm 波长处进行扫描。结果表明，对照品溶液在510 nm 处有最大吸收，因此选择510 nm 作为测定波长。在510 nm 波长处测定体系的吸收度，以吸收度(A)为纵坐标、浓度ρ芦丁(μg/ml)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=0.0136 ρ芦丁+ 0.006 28 (r=0.999 4)。结果表明，芦丁对照品在所试浓度0.00～56.00 μg/ml范围内呈良好的线性关系。 　　2.2 提取溶剂的选择 　　2.2.1 水提取称取野菊花粉末1.000 0 g于特制的微波提取罐中，加水40 ml，浸泡30 min 后，控制一定压力，在微波功率255 in。趁热过滤至100 ml容量瓶中，药渣用少量水洗涤3次，每次过滤。并入滤液，冷却，用水定容后备用。 　　2.2.2 乙醇提取称取菊花粉末1.000 0 g于特制的微波提取罐中，加φ=50 %乙醇40 ml，混匀，浸泡30 min 后，控制一定压力，在微波功率255 in。趁热过滤至100 ml容量瓶中。药渣用少量乙醇洗涤3次，每次过滤。并入滤液，冷却，用乙醇定容后备用。 　　2.2.3 样品液总黄酮含量测定 移取样品液3.00 ml于25 ml容量瓶中，按标准曲线制备方法进行操作、显色，测定吸光度，由标准曲线得到样品中总黄酮含量。结果见表1。由表1可知，以乙醇作溶剂的提取法优于以水为溶剂的提取法。用水做溶剂提取黄酮虽然存在生产成本低，无溶剂残留的优点，但存在提取率较低，提取液存放易腐败变质，后续的过滤、浓缩操作困难且费时等不足，因此本实验选择乙醇作为提取溶剂。表1 提取溶剂与总黄酮产率的关系 　　2.3 微波辅助提取单因素实验称取一定量的野菊花粉末，按照“2.2.2 ”项实验方法，采用单因数变换法分别试验料液比、微波辐射时间、乙醇浓度、微波辐射功率对野菊花总黄酮提取率的影响。 　　2.3.1 料液比对野菊花总黄酮提取率的影响 以φ=50 %乙醇为提取溶剂，微波功率255 . Antioxidant activity of the flavonoid hesperidin in chemical and biological systems[J]. Agric. Food Chem., 2005, 53 (12): 4757. 　　[3] Tirkey N, Pilkhacol., 2005, 5 (1): 2. 　　[4] Lee N K, Choi S H, Parksh, et al. Antiallergic activity of hesperidin is activated by intestinalmicroflora [J]. Pharmacoligy, 2004, 71(4): 174. 　　[5] Park Y B, Do K M, Bok S H, et al. Interactive effect of hesperidin and vitamin E supp lements on cholesterol