柔肝散结法对肝癌大鼠干预作用的研究.docVIP

　　柔肝散结法对肝癌大鼠干预作用的研究 【摘要】 　　目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) 及环氧合酶-2（COX-2）在肝癌大鼠中的表达以及柔肝散结法对其表达的影响。方法40只雄性SD大鼠，随机分为空白组、模型组、青消方组、青消方防治组（简称“防治组”），每组10只。除空白组外，其余3组大鼠均以含0.05%2-AAF的饲料喂养12周，防治组在诱癌的同时灌服青消方。青消方组于诱癌第4周开始给药，剂量均为25 g·kg-1 ·d-1。12周末观察瘤体积及瘤重量的变化，并采用免疫组织化学方法检测各组大鼠标本中VEGF及COX-2的表达。结果模型组VEGF及COX-2的表达明显高于空白组(Plt;0.01)；青消方组、防治组VEGF及COX-2的表达明显低于模型组(Plt;0.01)；防治组优于青消方组。结论VEGF及COX-2在肝癌大鼠中表达增强，柔肝散结中药青消方能降低肝癌大鼠VEGF及 COX-2的表达，早期 治疗 效果更佳。 【关键词】 柔肝散结法； 肝癌大鼠； 血管内皮生长因子； 环氧合 　　Abstract：ObjectiveTo approach the expression of the VEGF and COX-2 in rats :blank group, model group, QingXiao Fang group, FangZhi group, 10 rats in every group. Except for blank group, the other three groups e and the munehistochemical method.ResultsThe expression of VEGF and COX-2 in model group odel group(P＜0.01), FangZhi group surpassed QingXiao Fang group.ConclusionThe expression of VEGF and COX-2 ented in rats a公司。 　　1.2 实验过程及观察指标 　　40只雄性SD大鼠，体重（120±10）g，随机分为空白组、模型组、青消方组、青消方防治组（简称“防治组”），每组10只。空白组以标准颗粒饲料喂养，其余3组大鼠均以含0.05%2-AAF的饲料喂养12周，防治组在诱癌的同时，灌服青消方25 g/（kg·d）。青消方组于诱癌第4周开始给药，剂量为25 g/(kg·d)。空白组和模型组给以等体积的蒸馏水。各组每日灌药3 h前后均禁食。12周末处死大鼠，解剖腹腔，取出肝脏，观察肝脏大体形态，测定瘤体积及瘤重量。各组用10%福尔马林液固定，石蜡包埋，制备成4 μm厚的切片，用于VEGF及COX-2免疫组织化学检测，明确其在蛋白方面的表达。 　　1.3 统计学处理 　　使用SPSS11.5 for . 　　 2 结果 　　2.1 各组瘤体积和瘤重量的比较 　　青消方组、防治组与模型组相比，瘤体积缩小，瘤重量降低，有明显差异（P＜0.01）；防治组瘤体积缩小及瘤重量降低优于组青消方组（P＜0.01）。表1 实验末各组瘤体积及瘤重量的测定结果（略） 　　2.2 COX-2及VEGF免疫组化结果 　　VEGF及COX-2蛋白主要分布于细胞浆中， VEGF阳性细胞显示棕黄色或棕褐色颗粒；COX-2阳性结果呈棕黄色颗粒。4组大鼠每组选取10只大鼠标本，每个标本测量10个高倍镜视野。用阳性染色面积和显示屏面积的百分比表示该成分的相对含量。结果显示，模型组、青消方组及防治组VEGF和COX-2相对含量与空白组相比明显升高，有显著性差异（P＜0.01）；青消方组、防治组与模型组相比均明显降低，有显著性差异（P＜0.01）；防治组明显低于青消方组（P＜0.05）。表2 实验末各组肿瘤组织VEGF及COX-2的相对含量（略） 　 　3 讨论 研究表明，滋阴养血药物擅长保护骨髓功能，增加血液的白细胞、血红蛋白和血小板；软坚散结类药物能直接抑制、杀伤癌细胞，减少肿瘤细胞转移。因此我们采用具有益气柔肝、软坚散结作用的中药青消方为研究对象。青消方由太子参、白芍、绞股蓝、灵芝、冬凌草、鳖甲、蛇六谷等组成。 现代 药理研究显示蛇六谷具有明显抑瘤作用，在荷瘤小鼠体内有一定抑瘤率，达30.44%～42.25%［1］；绞股蓝的抗癌成分中，以20（S）原人参二醇抗肿瘤活性最高；从苦参中提取的苦参碱具有诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡等作用。 　　近年来研究表明，COX-2在绝大多数的肝细胞癌组织内呈过度表达［2］。COX-2与VEGF的研究主要集中在与肿瘤的发生 发展 的关系上［3］。本实验通过COX-2与VEGF在肝癌大鼠