桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究.docVIP

桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究.doc

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桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究.doc

  桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究 作者:李永华,卢栋, 朱开昕,裴河欢,赵明惠,阮金兰 【摘要】 目的考察桑寄生及其寄主植物夹竹桃、黄花夹竹桃强心苷含量的关系。方法采用比色法测定寄生在夹竹桃、黄花夹竹桃寄主植物上的桑寄生与其寄主夹竹桃、黄花夹竹桃强心苷含量。结果夹竹桃寄主的桑寄生枝的强心苷含量为0.33mg/g,叶的强心苷含量为0.98mg/g,分别是寄主枝、叶强心苷含量的4.3%和15.6%;黄花夹竹桃寄主的桑寄生枝的强心苷含量为0.27mg/g,叶的强心苷含量为0.84mg/g,分别是寄主枝、叶强心苷含量的11.5%和84.0%。结论寄生植物会以不同量的形式累积其寄主植物的特征性成分。 【关键词】 桑寄生; 寄主; 强心苷  桑寄生是 中国 传统常用中药材,具有补肝肾、强筋骨、祛风湿、安胎元等功效,用于 治疗 风湿痹痛,腰膝酸软,筋骨无力,崩漏经多,妊娠漏血,胎动不安,高血压等症[1]。桑寄生属半寄生性植物,具有广寄性特点,其寄主植物广泛,涉及多科多属多种,在野生状态下十分复杂[2]。由于寄主植物的不同,造成寄生药材的成分与功能差异,在国外已见研究报道[3,4]。在国内,伍朝筼等[5]对寄生在马桑树上的马桑寄生成分分析发现马桑寄生含有马桑树特征性马桑内酯,周芳等[6]对以夹竹桃为寄主的桑寄生与红花寄生强心作用实验研究发现红花寄生对离体蛙心具有夹竹桃样的强心作用而桑寄生则无强心作用。《中国药典》对桑寄生药材质量规范要求为不得检出强心苷。本文通过对以夹竹桃、黄花夹竹桃寄主植物上的桑寄生强心苷含量进行检测分析,一方面考察桑寄生及其夹竹桃、黄花夹竹桃寄主植物强心苷含量的关系,另一方面为桑寄生药材的安全使用提供 科学 依据。    1 材料   1.1 仪器与试剂岛津UV- 2550型紫外可见分光光度计;KQ-400KDE型高功率数控超声波清洗仪(江苏昆山超声仪器有限公司);地高辛对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号为100080- 200306);所用试剂均为分析纯,水为超纯水。   1.2 材料实验材料于2007-11分别采自广西南宁、钦州等地,经广西中医学院邓家刚教授鉴定寄生植物为广寄生Taxillus chinensis (DC.) Danser,寄主植物分别为夹竹桃Nerium indicum Mill和黄花夹竹桃Thevetia peruviana,将采集样品材料清洗干燥,枝叶分开粉碎(60目)后备用。    2 方法与结果   2.1 标准曲线的制备采用比色法进行测定[7]。精密称取105℃干燥至恒重的地高辛对照品10 mg,置25 ml 容量瓶中,用60%乙醇溶解后定容至刻度制成标准溶液。精密量取标准液0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 ml,置于具塞试管中,加60%乙醇稀释至1 ml,分别加入碱性苦味酸试剂(A液:1%苦味酸溶液;B液:1NNaOH溶液,使用前按A∶B=95∶5混合)4ml,摇匀,室温放置20 min,在波长494nm测吸光度。以吸光度A对浓度C作标准曲线,得回归方程为A=15.529C+0.033 1,r=0.9991,表明地高辛对照品在0~0.08 mg/ml 之间呈良好的线性关系。   2.2 稳定性实验精密量取样品溶液1.0 ml,依法显色20 min后,在波长494 nm,每隔5 min 测定1次吸光度。吸光度的RSD为2.1%,表明显色后室温放置20~40 min内,其吸光度较稳定(见表1)。表1 稳定性实验结果(略)   2.3 精密度实验精密量取样品溶液1.0ml,依法显色20min后,在波长494nm,重复测定6次(表2)。吸光度的RSD为0.2%,表明仪器精密度很好。表2 精密度实验结果(略)   2.4 重复性实验精密量取6份地高辛标准溶液各1.0ml,依法显色后,测定吸光度(表3)。吸光度的RSD为1.5%。结果表明本方法的重复性良好。表3 重复性实验结果   2.5 加样回收率实验 精密称取已知含量的寄主或寄生2.0g,5份,分别加入一定量的地高辛对照品,依法测定强心苷含量,平均回收率为92.3%,RSD为1.6%(见表4)。表4 加样回收率试验结果(略)   2.6 样品制备与含量测定   2.6.1 样品制备分别精密称取寄主、寄生枝、叶等样品2 g,分别置于50ml三角瓶中用70%乙醇超声提取3次,每次乙醇用量为20ml,每次超声提取时间为20min,过滤合并提取液,挥发去乙醇,过滤,滤液采用碱式醋酸铅溶液沉淀过滤去除色素,用饱和硫酸胺脱铅,用乙醇定容至50ml(样品液乙醇浓度60%)备测[8]。   2.6.2 样品强心苷含量测定精密量取各样品液1.0ml, 置于具塞试管中,分别加入碱性苦味酸试剂(

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