桔梗提取物中桔梗皂苷D的反相高效液相色谱检测方法研究.docVIP

　　桔梗提取物中桔梗皂苷D的反相高效液相色谱检测方法研究 作者：梁娟 潘见 谢慧明 高香兰 【摘要】 目的建立桔梗提取物中桔梗皂苷D的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法采用RP－HPLC法、蒸发光散射检测器（ELSD）测定桔梗皂苷D含量。色谱柱为Agilent ODS（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈∶0.5％乙酸溶液＝28∶72，流速1.0 ml/min；检测器为ethodsPlatycodin D content ance liquid chromatogram-ELS Detector（HPLC－ELSD）. Agilent Hypersil ODS (4.6 mm×250 mm，5 μm) obile phase l/ min speed. ELSD2420 detector ethod.ResultsPlatycodin D has good linear relation in 0.015625 mg/ml－0.25 mg/ml. r=0.9996. The recovery of platycodin D ples is determined. The obtained results indicate that this method is simple, accurate, and credible. 　　Key extracts； Platycodin D； HPLC-ELSD； Analytic method 　　在我国，以中药材为原料的中药提取物被用于医疗或保健食品已形成了一定的生产规模。规范中药提取物的质量对中药产业的 发展 至关重要，大量中药提取物还有待制订国家标准或行业标准［1］。桔梗提取物具有多种生物活性和很好的药用价值［2］，是市场畅销的中药提取物之一，但现无严格的质量标准。桔梗总皂苷是桔梗提取物的主要药效成分，其中桔梗皂苷D含量最高，药效较确定［3］。2005年版《 中国 药典》中桔梗药材是以总皂苷为指标，采用重量法测定总皂苷含量［4］，精确性较低。许传莲等［5～7］用高效液相色谱紫外检测器检测桔梗药材中桔梗皂苷D，但桔梗皂苷D 无共轭结构,无强的发色基团,末端吸收检测干扰较大。目前尚没有报道检测桔梗提取物中桔梗皂苷D的相关 　　2.7 重复性实验取同一批样品，用“2.3”项的方法处理，平行试验6次，测得桔梗皂苷D的含量为0.086 6，0.086 2，0.087 5，0.085 1，0.083 9，0.087 7 mg/ml。RSD＝1.72％。结果表明，在同一条件下，6次测得样品桔梗皂苷D含量一致，本方法重复性好。 　　2.8 回收率试验采用加样回收法，精密称取已知含量的样品6份，每份0.5g，精密添加桔梗皂苷D对照品3 mg，按“2.3”项下的方法制成样品溶液，取10 μl进样，测定桔梗皂苷D的含量。 计算 平均回收率为98.25％，RSD＝1.18％。结果见表1。结果表明，本方法回收率好。 　　表1 加样回收率试验结果（略） 　　2.9 样品含量测定按“2.3”项的方法制备样品，用上述方法对以下不同批次的桔梗提取物进行含量测定。结果见表2。 　　表2 桔梗提取物中桔梗皂苷D含量测定结果（略） 　　图1 乙腈∶水＝28∶72做流动相桔梗提取物色谱图 （略） 　　图2 乙腈：0.5％乙酸＝28∶72做流动相桔梗提取物色谱（略） 　　图3 桔梗提取物203nm时的UV-HPLC图（略） 　　图4 桔梗提取物的HPLC-ELSD图（略） 　 　3 讨论 　　通过改变ELSD的参数及流动相的组成与配比，最终选定漂移管温度：75℃；载气压力25psi。雾化器温度：36℃；流动相用乙腈∶0.5％乙酸＝28∶72。较