第九章 细菌的生长繁殖与培养精要.ppt

生物拮抗作用：即对病原菌的拮抗作用，如大肠菌素可抑制痢疾杆菌生长；唾液链球菌产生的H2O2抑制脑膜炎球菌生长。 营养作用：大肠杆菌及乳链球菌能合成VitB1、B12、泛酸、叶酸及VitC、K等，供机体利用；双岐杆菌产酸造成酸性环境可促进对VitD、Ca、Fe的吸收。 免疫作用：微生物具有免疫原性、促分裂和佐剂的作用，可剌激机体免疫系统发育和成熟。 正常菌群的生理意义 正常菌群与人体间的平衡状态，在某种特定条件下被打破，使原来不致病的正常菌群也能引起疾病，这些能引起疾病的微生物称为条件致病菌或机会致病菌。 （二）条件致病菌 二、人体正常菌群及分布 ①机体免疫机能低下：如大面积烧伤，过度疲劳，受凉，长期患消耗性疾病。 ②正常菌群寄居部位发生变迁：如外伤，手术，留置导尿管等使大肠杆菌进入腹腔、泌尿道或血液等。 ③不适当的抗菌素药物治疗导致菌群失调：如长期或滥用抗菌素治疗。 条件致病菌致病的特定条件 菌群失调：指机体、菌群、环境三者之间的动态平衡发生改变，导至体内正常菌群中各种细菌的数量和比例发生大幅度的变化，生态体系表现出的不平衡状态。 菌群失调症：指严重的菌群失调使机体发生功能紊乱表现出明显临床症状者。菌群失调症又叫菌群交替症（二次感染）。 菌群失调经常发生而菌群失调症则少见。患二重感染的机体抵抗力很弱，细菌对抗菌素药物不敏感，治疗难度大，应严加预防，避免发生。 菌群失调及菌群失调症 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物的方法，但不一定杀死细菌芽胞。 灭菌（sterilization）：杀死物体上包括芽胞在内的所有病原性和非病原性微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的无菌操作。 第二节 消毒灭菌 热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类。在同一温度下， 后者效力比前者为大，这是因为： （1）湿热的穿透力比干热大； （2）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。水由气态变为液态时释放出的潜热，可迅速提高被灭菌物体的温度。 一、物理消毒灭菌法（重点） （一）热力灭菌法 1、湿热灭菌法 高压蒸气灭菌法：一种最常用、最有效的灭菌方法。利用密闭的容器加热产生的蒸汽灭菌，通常103.4kPa（1.05kg/cm2）的蒸汽压力下，容器内温度可达121.3℃，维持15～30分钟，即可达到灭菌的目的。凡耐高温、耐潮湿的物品，如手术器械、敷料和一般培养基等，均可用此法灭菌。 煮沸法：水温100℃经5分钟可杀死细菌繁殖体，常用于食具、刀剪、注射器等的消毒，细菌芽胞需煮沸1～2小时才被杀灭。水中加入2%碳酸氢钠，可使沸点达105℃，既可促进杀灭芽胞，又能防止金属器械生锈。 （一）热力灭菌法 流通蒸气法：利用蒸笼或阿诺蒸锅进行消毒。流通蒸汽法温度不超过100℃，经15～30分钟可杀死细菌繁殖体；把流通蒸汽加热的物品放置37℃温箱过夜，促使芽胞发育成繁殖体，次日再经流通蒸汽加热，如此重复3次，可达到灭菌的目的，称为间歇灭菌法，常用于不耐高温的材料如培养基的灭菌。 巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中病原菌或特定微生物，而不影响其营养成分及香味的消毒法，常用于牛奶、酒类的消毒。 1、湿热灭菌法 （一）热力灭菌法 焚烧：直接点燃或在焚烧炉内焚烧，是一种彻底的灭菌方法，但仅适用于废弃物品或尸体等。 烧灼：直接用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的接种环、 试管口、瓶口等的灭菌（图3-2）。 干烤：用烤箱灭菌。一般加热至160℃～170℃经2小时。适 用于高温下不变质、不蒸发的物品， 如玻璃器皿、瓷器等。 2、干热灭菌法 （一）热力灭菌法 紫外线：紫外线的杀菌作用与其波长有关，通常紫外线波长为240～280nm时具有杀菌作用，其中 以260nm最强，这与细菌DNA吸收光谱范围相一致。紫外线杀菌机理主要是作用于细菌DNA，干扰细菌DNA的复制与 转录，导致细菌的死亡或变异。紫外线穿透力差，故只适用于空气及不耐热物品的表面消毒。 电离辐射：高速电子、X 射线和γ射线等在足够剂量时，对各种细菌均有致死作用。其机制在于产生游离基，破坏细菌DNA。电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品的消毒。 （二）紫外线与射线灭菌法 滤过除菌：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌的目的。所用的器具是滤菌器。 主要用于一些不耐高温灭菌的血清、细菌毒素、抗生素，以及空气等的除菌。 滤菌器的种类很多，目前常用的有滤膜滤菌器、石棉滤