中药注射剂溶血性试验方法的研究概述.pdfVIP

StraitPharmaceuticalJournalVol19No．82007 处无最大吸收。 参考文献 3 讨论 [1]国家药典委员会编．中国药典[s]．北京：化学工业出版社，2005 本文采用分光光度法测定燕窝含量及鉴别燕窝真伪，从 年版，二部 (附录 lvA)． 方法学考察结果可见 ，本方法重现性 良好，回收率满意。测定 [2]黄华军，等 ．分光光度法检测燕窝及其制品中燕窝含量[J]．广州 食品工业科技，2003，1007—2764，03—0029～68． 结果准确稳定，方法简单，可作为燕窝制品生产企业原料的质 量控制方法。 中药注射 剂 溶血性 试 验方 法 的研 究概 述 章宝娟 (浙江省绍兴第--BE院绍兴312000) 摘要：目的 从实验方法方面介绍溶血性试验方法的研究进展；为进行相关课题研究提供理论依据，提高课题研究的效率。方法 以国内外 大量近期有代表性的文献为依据进行分析、归纳整理。结果 各有优缺点，其中以紫外分光光度法被推案。结论 在各种溶血性试验方法中 紫外分光光度法是一种比较适合的方法。 关键词：溶血；乳酸脱氢酶；分光光度法；红细胞计数法 中图分类号：R285．1 文献标识码 ：A 文章编号：1006-3765(2007)08-0079-03 某些中药注射剂，由于含有溶血成分(皂苷)或物理、化 为供试品溶液；用于血管内给药的注射剂以各药品使用说明 学及生物等方面的原因，在直接注入血管后可产生溶血作用； 书规定的临床使用浓度作为供试品溶液。(3)试验方法：取 也有些注射剂中因含有杂质等成分，注入局部会引起胀痛，注 洁净试管7只，进行编号，1～5号管为供试品管，6号管为阴 入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液循环功能障碍等不 良 性对照管，7号管为阳性对照管。按下表所示依次加入2％红 反应；另外，因中药制剂的成分复杂，也存在因免疫反应引起 细胞悬液、0．9％氯化钠溶液或蒸馏水，混匀后，立即置37~C 的免疫性溶血。因此 ，凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或 ±0．5℃的恒温箱中进行温育，开始每隔 15min观察 1次．1h 非免疫性溶血反应的其他药物制剂均应进行溶血性试验。 后 ，每隔1h观察 1次，一般观察3h。有些观察4h以及次 日再 溶血性试验 (Hemolyticassay)是考察受试物是否具有溶 观察 1次。同时，及时记录。按下列顺序加入各种溶液(见表 血和红细胞凝聚等反应。药物制剂引起的溶血反应又可分为 1)。结果观察 ：若试验中的溶液呈澄明红色，管底无细胞残 免疫性溶血和非免疫性溶血两类。免疫性溶血是药物通过免 留或有少量红细胞残留，表明有溶血发生；如红细胞全部下 疫反应产生抗体而引起的溶血 ，为 Ⅱ型(由IsG介导)和Ⅲ型 沉，上清液体无色澄明，表明无溶血发生。若溶液中有棕红色 (由IsG、IgM介导)过敏反应；非免疫性溶血是药物直接导致 或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝聚发生。 的溶血和红细胞凝聚等。 如有红细胞凝聚的现象，可按下法进一步判定是真凝聚还是 1 原理及其方法 假凝聚。若凝聚物在试管振荡后又能均匀分散，或将凝聚物 1．1 常规体外试管法(肉眼观察法) (1)原理：通过肉眼来 放在载玻片上 ，在盖玻片边缘滴加2滴0．9％氯化钠溶液，置 观察判断溶血情况。(2)方法 ：①2％(V／V)血细胞混悬液 显微镜下观察 ，凝聚红细胞能被冲散者为假凝聚，若凝聚物不 的配制：取兔血、羊血、犬血或人血数毫升 (约20mL)，放人含 被摇散或在玻片上不被冲散者为真凝聚。(5)结果判断：当 玻璃珠的三角烧瓶中振摇 10min，或用玻璃棒搅动血液，除去 阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生时，若 纤维蛋白原，使成脱纤血液。加 0．9％氯化钠溶液约 10倍 受试物管中的溶液在3h内不发