酶免疫分析中基于棋盘格的抗原抗体组合变化对检测参数的 ….docVIP

利用棋盘格试验直接筛选酶免疫测定最佳包被抗原抗体浓度的研究 谭伟明1 何素平2 张 蕾1 赵洪伟2 赵 静2 李召虎2 李学锋1 王保民* 2 Qing X. Li3 1（中国农业大学理学院，北京 100094） 2（中国农业大学农学与生物技术学院， 北京 100094） 3（Department of Molecular Biosciences and Bioengineering, University of Hawaii, Honolulu , USA） 摘　要　本文以两个单克隆抗体及其相应的包被抗原为例，研究了包被抗原与抗体组合对免疫检测中0孔吸光度值、IC50值和标准曲线斜率的影响。结果发现，和IC50值随包被抗原与抗体稀释倍数增加而降低；斜率随抗体稀释倍数增加而降低，随包被抗原的稀释倍数表现出先增加后低的趋势对于同一抗体浓度的组合中，斜率最大值出现使板吸附达到饱和的包被抗原浓度。综合确从棋盘格试验中直接筛选最佳包被抗原、抗体组合的标准：选择使板吸附达到饱和的最大包被抗原稀释倍数0孔吸光度值1.0左右的抗体稀释倍数。， 1 引 言 酶联免疫吸附测定（ELISA）是最为常用的免疫化学分析方法之一，现已广泛应用于农药、兽药、环境污染物、真菌毒素、植物激素和中药有效成分等小分子的快速检测。 无论是直接、间接还是简化的间接竞争ELISA[]，各免疫试剂的