火棉胶切片1.ppt

火棉胶切片（celloidin sections method) 火棉胶（collodion)又称硝化纤维，由浓硝酸和浓硫酸作用于脱脂棉而成。 特点：火棉胶易溶于乙醚和酒精混合液，易燃烧。 制片过程不经过加温包埋，故减少了组织收缩和过度硬化。 适用于大快或较坚硬的组织，常用于眼球、内耳、肌腱、脱钙骨、软骨成骨、膜内成骨和神经组织的许多特殊染色方法。 缺点：制片时间长，切片厚，操作复杂。 一、火棉胶的配制 火棉胶有固体和液体两种 固体火棉胶用无水酒精和等量乙醚混合液溶解，配制成5%、10%。。。。液体火棉胶备用。 2.摇动使其加速溶解 3.密闭闭光保存，防止乙醚和酒精的挥发。 4.配制火棉胶要保持绝对无水。 5.配制火棉胶要严禁烟火、高温和猛烈打击，避免引起燃烧或爆炸 二、组织固定 固定方法同石蜡切片，但是不易用含有苦味酸的固定液。 三、脱水 脱水时间要长一些，彻底除去组织中的水分。 50%酒精24-36小时 70%酒精24-36小时 80%酒精12-24小时 95%（Ⅰ）酒精12-16小时 95%（Ⅱ）酒精12-16小时 100%（Ⅰ）酒精8-12小时 100%（ Ⅱ ）酒精8-12小时 四、浸透 1：1酒精乙醚12-24小时 5%火棉胶4-6天 10%火棉胶6-8天 15%火棉胶8-106天 20%火棉胶10-15天 五、包埋 20%火棉胶包埋 用少量三氯甲烷使其硬化。 放置70%酒精中长期保存。 六、切片 切片厚度10-15cm 七、染色----贴片-----脱水和封固 第三章 骨切片的制作技术 概述 一、骨磨片 1、空气封闭制片法 染色结果 （1）取材 取经过固定的人长骨一段，用细钢锯锯成1mm左右的骨片，纵切和横切个一。 （2）研磨 分为人工和机器 ，先粗磨至100um再细磨50um （3）脱水与脱脂 洗涤 酒精脱水 乙醚30分钟脱脂 干燥 封固 观察结果 二、骨切片 1、取材 取长骨骨干，厚度0.5-1cm 为宜. 2.固定 (1)10%或25%甲醛水溶液固定24-36小时. (2)muller 重铬酸钾2.5g 硫酸钠1g 蒸馏水100ml (3)Zenker (4) Zenker甲醛固定液 Zenker液45ml 甲醛5ml,该液对骨组织固定较好. 3.脱钙 分类:酸类单纯脱钙法, 酸类混合脱钙法,离子交换树脂法,电离脱钙法,脱钙机法. (1)酸类单纯脱钙法 甲酸 :10%或25%甲酸水溶液,2天更换一次. 5%或8%的硝酸水溶液. 5%盐酸水溶液. (2)酸类混合脱钙法 ①甲酸为主的混合脱钙剂 Gooding;Stewant’s液 甲酸5-25ml、甲醛5ml、蒸馏水加到100ml。密质骨5-10天完成脱钙。 ②盐酸为主的混合脱钙剂（Von Ebner’s液）盐酸5ml、氯化钠175g、蒸馏水100ml，用时每200ml液内每日添加浓盐酸1ml ③硝酸为主的混合脱钙剂 （Schcidde’s液） 硝酸20ml、甲醛10ml、蒸馏水70ml，脱钙快速、完全，如果加温可以在数小时完成脱钙。 （3）离子交换树脂脱钙法 将氨型磺化树脂铺于容器底部，厚为1.5cm，将标本放置树胶上面，加入脱钙剂。乙二胺四乙酸（EDTA) （4）电解脱钙法 电解脱钙法是将两电极插入脱钙剂中，使脱钙剂中有电流通过，将液中钙离子吸引到阴极，从而发生电离作用，加速脱钙过程。该方法可以用于大量标本或大标本的制作。 （5）脱钙机脱钙法 大部分脱钙机原为加热恒温法、电离法、超大型声波法、真空减压法等。还要靠酸类脱钙剂，组织容易破坏，影响染色，优点是脱钙速度快。 4脱钙后流水冲洗12-24小时 5用5%硫酸钠浸泡8-12小时中和强酸。 6流水再冲洗8-12小时。 7可以用冰冻切片，也可以用石蜡或火棉胶切片。 其他制片技术 冰冻切片、涂片、铺片 * * *