报告基因原理及应用.pptVIP

Amplite? Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow* 荧光素酶报告基因检测试剂盒 报告基因（reporter gene） 报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 常见的报告基因有β-半乳糖苷酶 、β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶等，其中荧光素酶应用最为广泛。 荧光素酶（luciferase） 荧光素酶是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称 萤火虫荧光素酶 最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis 的萤火虫体内的荧光素酶 研究最早，应用范围最广 翻译后无需修饰，直接具有完全酶活性 催化反应需要底物荧光素、ATP、O2、Mg2+等参加 需要裂解细胞 试剂盒成分 检测原理 Amplite? Fluorimetric Sphingomyelinase Assay Kit鞘磷脂酶SMase检测试剂盒 Amplite? Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit赖氨酸氧化酶检测试剂盒 生物样品中赖氨酰氧化酶的活性 传统方法：H3氚 放射性同位素标记 试剂盒：HRP-coupled来检测底物LOX中 H2O2的释放检测。 灵敏度高，低至40 ng Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd 质量第一 客户至上 Reporter: 何小丹 Tel022Email：techsupport@sungene.sinacorp.cn 发光昆虫 发光海蜗牛 发光真菌 发光水母 荧光素模型 1瓶（1000mL） 1瓶（100mL） 1瓶（10mL） Component B:检测缓冲液 1瓶 1瓶 1瓶 Component A:荧光素酶底物（光敏感） Cat.NO.12520 (100 plates) Cat.NO.12519 (10 plates) Cat.NO.12518 (1 plate) Components 荧光素酶（luciferase）可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在反应过程中会发出生物荧光，然后通过荧光测定仪器测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光量 ，经过数据处理计，算出被测样品中luciferase的含量。 通过荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。 luciferin oxyluciferin 检测流程 待测样品 检测液 检测荧光强度 制作标曲和检测样品时都要设置对照孔 荧光素酶底物 检测液缓冲液 充分混合 代入标准曲线 计算荧光素酶含量 培养细胞 加入待测化合物 等体积反应 室温孵育，避光 荧光素酶底物加入检测缓冲液中混匀 检测液加入孔中，测定发光值 待测样品加入96孔板中 磷酸胆碱 SMase 鞘磷脂 应用：Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts and solutions. 灵敏度:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution. * * Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd 质量第一 客户至上