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浅谈技术创新 糖尿病是继心血管疾病、癌症之后致死率高的第三大疾病。临床上主要有两种类型，Ⅰ型为胰岛素依赖性糖尿病，Ⅱ型为非胰岛素依赖性糖尿病。Ⅰ型糖尿病主要由于体内胰岛素缺乏，必须用胰岛素治疗，约占全部糖尿病的十分之一。Ⅱ型糖尿病主要由于体内胰岛素受体减小或其敏感性降低，一般可用口服降糖药治疗，但在较严重感染、创伤，肝、肾功能损害，眼底病变出血等情况下也需用胰岛素控制。直到目前，胰岛素在糖尿病的治疗中仍有十分重要的作用。 从胰岛素的发现，到现今的广泛生产应用，技术创新起到了无可替代的作用。本文就以胰岛素的研究发展为案例，对技术创新进行浅析。主要内容包括胰岛素的研究进展、技术创新的定义和特征、技术创新的地位和作用、技术创新的基础、技术创新的动力、技术创新的过程等。 一、胰岛素研究和生产应用 胰岛素是一种多功能的蛋白质激素，它对人体物质代谢有着广泛而深刻的调节作用，同时，它还是一种重要的生长调节因子，可刺激多种细胞的增殖与分化。胰岛素对代谢的调节作用已广为人知，它促进组织细胞对葡萄糖的摄取和利用，它还加速糖原的合成、抑制糖原的异生，因此具有降血糖作用，是体内唯一的降血糖激素，对于维持糖稳态具有重要作用，当胰岛素分泌不足时，血糖会急剧升高。胰岛素不仅对糖，它对脂肪和蛋白质的合成也有促进作用，因此，胰岛素对代谢的作用的总趋向是促进营养物质以不同形式保存起来，人们常将其称为“贮存激素”。 （一）胰岛素的发现 1920年，美国的病理学家Moses Barron在做胰导管结石病人的尸体解剖时发现胰脏的外分泌细胞已经坏死，但是大部分胰岛细胞仍然存活。1921年5月19日Banting和他的助手，多伦多大学医学院的学生Charles Best在多伦多大学生理系MacLeod教授的实验室中开始用狗进行试验。经过一个夏季的努力，他们终于成功地从狗的萎缩胰脏中得到了有活性的提取液，然后给一条切除胰脏的狗注射胰岛素，另一条切除胰脏的狗不注射作为对照。结果没有注射的狗于4天后死亡，而注射胰岛素的狗仍然活着，直到3星期后因提取液用尽才死去。1922年经过初步纯化的动物胰岛素即应用于糖尿病人，并取得了惊人的效果。1922年1月23 日，14 岁的Leonard Thompson成为第一个接受胰岛素的治疗并获得成功的糖尿病人。从那以后，无数的糖尿病人因注射胰岛素而得到挽救。胰岛素的问世也引起了许多科学家的兴趣。他们对胰岛素的生产、生物合成、化学合成、结构、功能、作用机制等进行了一系列的研究并获得了多个里程碑式的成果。 （二）从动物胰脏提取分离胰岛素 动物胰岛素的生产起始于加拿大的Connaught Laboratories，大量生产主要在美国的礼来（Eli Lilly）公司。1923年末商品胰岛素已广泛应用于临床。生产胰岛素的原料主要是牛或猪的胰脏。为抑制胰酶的水解作用，提取胰岛素的溶液是70 %的酸性乙醇。提取液减压蒸发去除乙醇后再用氯化钠盐析就可得到粗制品。粗品经部分纯化后，在锌离子的作用下就可以得到纯度较高的胰岛素结晶。从动物胰脏提取分离胰岛素，产品纯度较低，副作用较大，到80年代末，由于采用了新的层析技术进行纯化，产品纯度大为提高。虽然如此，猪胰岛素还是存在一个副作用问题，尤其作为长期用药，个别患者副作用突出，故人胰岛素的开发很重要。 （三）酶法转化制备人胰岛素 猪胰岛素链末端的B30是丙氨酸，而人胰岛素的B30为苏氨酸，故可通过酶促化水解切去B30丙氨酸，再以酶催化接上苏氨酸，则可制得人胰岛素。 （四）基因工程重组人胰岛素 重组DNA 技术的出现为利用微生物生产人胰岛素铺平了道路。1979年，美国 Genentech公司的Goedell等报道了化学合成的人胰岛素基因在大肠杆菌中的表达。1982年，美国礼来公司生产的重组人胰岛素Humulin上市。胰岛素分子是由A、B两条链组成的。在开始阶段，两条链在大肠杆菌中分别表达，然后参照人工合成胰岛素的条件在体外连接成胰岛素。这样做步骤比较复杂，两条链在体外连接的效率比较低。实际上在胰岛细胞内胰岛素是以一条链胰岛素原的形式合成的。因此，以后在大肠杆菌中表达的是胰岛素原。表达产物在体外用胰蛋白酶和羧肽酶B去除连接的C肽和多余的碱性氨基酸后使胰岛素原变为胰岛素。后来又将胰岛素原改为Mini胰岛素原，即以几个氨基酸组成的小肽代替31个氨基酸组成的C肽。在大肠杆菌中，表达产物形成包涵体，须变性和复性，使表达产物的后加工和纯化复杂化。 （五）改进重组人胰岛素的生产 为改进重组人胰岛素的生产，丹麦的诺和诺德（Novo Nordisk）公司用酿酒酵母真核细胞表达一种胰岛素单链前体，在前体中B1至B29通过甘-甘-赖三肽和A1至A21相连接。表达产物在体内经过酶加工，形成二硫键的正确配对后分泌至培养基中。由于是分泌表达，前体的