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膨润土絮凝法精制刺五加水提液的研究.doc
膨润土絮凝法精制刺五加水提液的研究
【摘要】 目的考察膨润土絮凝剂对刺五加水提液的澄清效果。方法将膨润土用于刺五加水提液的澄清,以水提液中有效成分总黄酮的保留率及浸出物得率为考察指标,并与醇沉法进行比较。结果膨润土絮凝法与醇沉法同样能使药液澄清,能有效降低总固形物的量,而对水提液总黄酮的保留率要优于醇沉法。结论膨润土絮凝剂可用于刺五加水提液的澄清工艺。
【关键词】 刺五加水提液; 絮凝; 膨润土; 总黄酮
刺五加主要分布在我国的东北和华北等地,为五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim) Harms syn的干燥根和根茎,具有补中益气、健脾补肾,安神醒脑的功效,用于脾肾阳虚、体虚乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多梦等病症,其中刺五加中所含总黄酮是其有效成分,刺五加制剂在神经官能症、神经衰弱、高脂血症、冠心病、脑血栓、心绞痛、低血糖等疾病的 治疗 中均具有显著疗效[1]。
刺五加水提液生产工艺中采用中药制剂常用的水提醇沉澄清工艺,不仅需要消耗大量的乙醇,生产成本高,乙醇回收复杂,而且易造成有效成分的损失,影响制剂的疗效。膨润土是一种具有层状结构的水合镁铝硅酸盐非金属黏土矿物,作为一种天然的澄清剂,资源丰富,安全无毒[2,3]。为了最大限度地保留刺五加水提液的有效成分,本实验采用膨润土作为刺五加水提液的絮凝剂,用于刺五加提取液的絮凝和精制,选择总固形物和黄酮总含量作为评价指标,并与传统醇沉法进行比较。
1 仪器和材料
722型可见分光光度计(上海精密仪器仪表有限公司);电热恒温鼓风干燥箱(山东潍坊医药集团股份有限公司医疗器械厂);ESJ 210-4型 电子 天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)。刺五加根和茎饮片(产地黑龙江);芦丁对照品(批号0080-9705, 中国 药品生物制品检定所);膨润土(化学纯,上海四试赫维化工有限公司);无水乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠等试剂均为分析纯。
2 方法和结果
2.1 絮凝剂溶液的配制准确称取5 g膨润土,用100 ml蒸馏水浸泡24 h,使之充分吸水分散成胶体悬浮液,即得5%(l,浸泡30 min后,煎煮1 h,滤过后,挤干滤渣,滤渣再煎煮1 h,合并两次滤液,加热浓缩至每毫升煎剂含生药0.2 g。
2.3 刺五加水提液中总黄酮含量的测定[4]
2.3.1 标准曲线的绘制精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品9.8 mg,置50 ml量瓶中,加60%乙醇适量,超声处理使溶解,放冷,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。精密量取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 ml分别置25 ml量瓶中, 加60%乙醇溶液至6 ml,加5%亚硝酸钠溶液1 ml,摇匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 ml,摇匀,放置6 min,再加4%氢氧化钠溶液10 ml,用60%乙醇稀释至刻度,放置15 min,以相应的溶液为空白,在波长510 nm处测定吸光度。重复测定3次,以吸光度为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程:Y=11.199X-0.066 2,Y为浓度mg/ml;X为吸光度;相关系数r=0.999 4,n=5,说明在7.84×10-3~ 3.92×10-2 mg /ml范围内线性关系良好。
2.3.2 总黄酮含量的分析精密量取“2.2”项刺五加水提液0.25 ml置于25 ml量瓶中,加60%乙醇溶液至6 ml,加入5%亚硝酸钠溶液1 ml,摇匀,放置6 min,再加入10%硝酸铝溶液1 ml,摇匀,放置6 min,再加入4%氢氧化钠溶液10 ml,用60%乙醇稀释至刻度,放置15 min,以相应的溶液为空白,在波长510 nm处测定吸光度。根据回归方程分别 计算 澄清前后刺五加水提液中总黄酮含量。并按下式计算有效成分总黄酮保留率:总黄酮保留率(%)=澄清后药液总黄酮的量(g)/澄清前药液总黄酮的量(g)×100%。
2.3.3 固形物收率的测定精密量取刺五加水提液25 ml,置于干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干后于105℃烘箱中干燥至恒重,在干燥器中放置30 min,迅速称重,与絮凝处理前样品液中的固形物相比,计算固形物收率。
2.4 水提液浓缩比的选择取浓缩至生药量(g)与药液体积(ml)比为1∶1,1∶2,1∶5,1∶10的提取液各25 ml,分别加入絮凝剂2.5 ml,于室温下搅拌1 h,在室温下静置24 h后将膨润土及沉淀物分离,观察药液的澄清度,过滤,测定滤液中固形物总量及总黄酮含量。刺五加水提液浓缩比对絮凝效果的影响结果见表1。结果表明,药液浓度过大时,由于溶液粘稠,加入絮凝剂后,不利于大分子的分散,因而澄清效果较差。而提取液浓
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