青梅茎中岩白菜素的提取工艺研究.docVIP

　　青梅茎中岩白菜素的提取工艺研究 作者：莫峥嵘 蔡仁文 李玖慧 陈光英 韩长日 【摘要】 目的研究青梅茎中提取岩白菜素的最佳工艺。方法以岩白菜素含量为指标，比较冷浸提取、超声提取、回流提取3种方法提取物中岩白菜素含量。并以正交实验确定回流提取的最佳工艺。结果3种提取方法中回流提取的提取物中岩白菜素含量最高，正交实验优化条件为：料液比为1：15，提取时间为1.5 h，提取次数1次。结论在此最佳参数组合下，岩白菜素的含量为0.23%。 【关键词】 青梅； 岩白菜素； 提取工艺 　　Abstract：ObjectiveTo study the best extraction technology of bergenin from the stem of Vatica Mangachpoi Blanco groum reflux extraction ental investigation.ResultsThe optimum parameters of extracting bergenin e,and 1:15 of the ratio of material and solvent.ConclusionThe yielding content of bergenin um parameters. 　　Key angachpoi Blanco; Bergenin; Extraction technology 　　青梅Vatica mangachpoi Blanco系龙脑香科(Diptercocarpaceae)青梅属(Vatica genus)植物，主要分布于海南保亭、三亚、东方、白沙、乐东、万宁和琼中等地［1］。在民间，海南青梅叶长期用作杀菌消毒、 治疗 肝炎及提取中药龙脑香。 　　通过对青梅茎的有效成分的提取、分离、纯化及结构鉴定，确定青梅中含有岩白菜素(bergenin ) ［2］。岩白菜素主要作用是止咳祛痰，但近年的药理实验发现岩白菜素还具有抗炎、护肝、抗溃疡、提高免疫等作用［3］。陈光英等［4］用高效液相色谱法测定青梅茎皮中岩白菜素的含量，其含量为0.8%。 　　由于青梅茎中含有大量的岩白菜素，而青梅茎中岩白菜素的提取工艺研究还未见报道，因此，为了充分利用青梅药用植物，本实验拟对青梅茎岩白菜素的提取工艺进行实验和比较，以期优化、筛选出理想的提取工艺。 　 　1 器材 　　大连依利特公司UV230紫外检测器，P230高压恒流泵（双泵），EC2000工作站；日本SHIMADZU十万分之一天平；甲醇为色谱纯, 水为重蒸水, 其余试剂为分析纯；岩白菜素标准品（购自芜湖尔塔医药科技有限公司）；青梅药材采自海南万宁，经海南师范大学生命 科学 学院钟琼芯副教授鉴定为龙脑香科青梅属植物Vatica mangachpoi Blanco，样本保存在海南师范大学热带药用植物化学重点实验室内。 　　 2 方法 　　2.1 色谱条件［4］色谱柱：Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：A：0.5% 冰乙酸水溶液（V/V），B：甲醇。梯度洗脱，洗脱条件如下：0 min(A:80,B:20 V/V)；10 min(A:65,B:35 V/V)；25 min(A:64,B:36 V/V)；30 min(A:0,B:100 V/V)；42 min(A:20, B:80 V/V)；流速：0. 4 ml· min-1；检测波长274 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μl。在此色谱条件下，青梅茎中岩白菜素样品与岩白菜素对照品相比较，保留时间基本一致，在274 nm波长处其它色谱峰干扰小，青梅茎岩白菜素得到较好的分离而且含量较高，见图1和图2。 　　图1 岩白菜素对照品的HPLC图谱（略） 　　2.2 标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的岩白菜素对照品10 mg , 置于25 ml 容量瓶中，加甲醇溶解并定容，制成浓度为0.4 mg·ml-1 的储备液。以此为母液配制浓度为0.2 mg·ml-1溶液；再以0.2 mg·ml-1为母液，配制浓度为0.1 mg·ml-1的溶液；依次类推，配制成浓度分别为0.05 ，0.02 5，0.012 5 mg·ml-1的标液［4］。精密吸取不同浓度的对照品溶液各10μl，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，对照品进样质量为横坐标，进行回归分析，则回归方程为Y＝3961.7X-103.4，R2=0.999 1，结果表明，在0.125～4 μg之间，峰面积与进样量之间的线性关系良好。该定量分析方法可用于青梅茎提取液中岩白菜素含量的检测分析。 　　图2 青梅茎岩白菜素样品的HPLC图谱（略） 　　2.3 不同提取方法提取物中岩白菜素的含量比较［5］