基于树状分子提高AMOZ半抗原免疫原性的研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.8 基于树状分子提高AMOZ 半抗原免疫原性的研究 刘凤银，沈玉栋，肖治理，杨金易，孙远明，王弘，雷红涛，徐振林 （华南农业大学食品学院，广东省食品质量安全重点实验室，广东广州 510642） 摘要：3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮（AMOZ ）是抗生素呋喃它酮的代谢产物，具有潜在致畸、致癌性。由于分子量太小，其 特异性抗体制备尚未突破，无法建立直接检测的免疫分析方法。为了制备针对AMOZ 的特异性抗体，本研究首次尝试采用赖氨酸树 状分子(G5)替代传统载体蛋白，将AMOZ 的乙醛酸衍生半抗原AMOZA 直接偶联到G5 分子上制备免疫原（AMOZA-G5 ），免疫Balb/c 小鼠，收集抗血清并进行间接竞争酶联免疫分析(ciELISA)测定。结果发现：传统免疫原AMOZA-BSA 对应的抗血清无法特异性识别 游离AMOZ ，而AMOZA-G5 对应的抗血清则可以特异性识别游离AMOZ ，在ciELISA 实验中，1 μg/mL AMOZ 对抗体活性的抑制 率为 35% ，说明以赖氨酸树状分子为载体可以有效提高小分子半抗原的免疫原性。本研究对于制备其他小分子半抗原的特异性抗体 提供了方法借鉴。 关键词：树状分子；半抗原；抗体；3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮（AMOZ ） 文章篇号：1673-9078(2015)8-31-36 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.8.006 Enhancing the Immunogenicity of Hapten 3-Amino-5-morpholinomethyl -2-oxazolidone (AMOZ) Using Dendrimer as a Carrier LIU Feng-yin, SHEN Yu-dong, XIAO Zhi-li, YANG Jin-yi, SUN Yuan-ming, WANG Hong, LEI Hong-tao, XU Zhen-lin (South China Agricultural University, Guangdong Provincial Key laboratory of Food Safety and Quality, Guangzhou 510642, China) Abstract: 3-Amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidone (AMOZ), a metabolite of antibiotic furaltadone, is a potential teratogenic and carcinogenic substance. However, an immunoassay for the direct estimation of AMOZ was so far unavailable due to its low molecular weight and lack of a specific antibody. In this study, polylysine dendrimer (G5) was used for the first time instead of thetraditional carrier (bovine serum albumin (BSA)), to conjugate with AMOZ glyoxylate derivative hapten (AMOZA) to generate the immunogen (AMOZA-G5) that would produce AMOZ -specific antibodies. Balb/c mice were immunized, antisera were collected, and examined by