植物逆境生理水孔蛋白2013.pptVIP

水孔蛋白（aquaporin, AQP） 水通道即存在于哺乳动物、植物和微生物细胞膜中转运水的特异孔道，该孔道是由一系列具有同源性的内在膜蛋白家族成员（membrane intrinsic proteins，MIP）所组成，称为水通道蛋白或水孔蛋白(aquaporin, AQP)。 植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道，在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。 有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用，因此研究水孔蛋白引起了广泛关注。 　约翰霍普金斯大学医学院的Peter?Agre教授因发现水通道蛋白获得2003年诺贝尔化学奖? 他与通过X射线晶体学技术确认钾离子通道结构的洛克斐勒大学霍华休斯医学研究中心的罗德里克·麦金农共同荣获了2003年诺贝尔化学奖。 植物水孔蛋白主要分布在质膜和液泡膜上。 PIP与TIP之间的氨基酸同源性较低 (约50%左右)，而且PIP较TIP具有较长的N端。 水孔蛋白在植物中的含量也是相当高的。例如，萝卜的TIP占总液泡膜蛋白的40%；萝卜的PIP也占总质膜蛋白的10%；拟南芥PIP2则占总质膜蛋白的15% ；拟南芥的5种PIP1至少占总质膜蛋白的1 % 水孔蛋白在植物中有如此广泛的分布和高的含量，暗示着水孔蛋白在植物生命活动中具有极其重要的作用。 AQPl单体含有6个倾斜的跨膜a螺旋，组成了一个右手螺旋束。 AQPl很短的N端位于胞质侧。螺旋1穿过胞膜，通过胞外的loopA与螺旋2相连。螺旋2又顺邻近螺旋1的地方穿回膜内，并目靠近AQPl四聚体的轴心。 在螺旋2的胞质侧，loopB又折回膜内，将NPA结构放在膜的中间位置，紧接NPA结构形成螺旋HB，螺旋HB靠近螺旋6。在胞质侧，距离四聚体轴心最远的地方，HB从膜内出来和螺旋3相连接。 螺旋3在邻近螺旋1的地方穿出胞膜。LoopC位于胞外，连接着螺旋3和4。 螺旋4穿过胞膜，通过很短的靠近四聚体的loopD与螺旋5连接。 螺旋5穿过螺旋2和4的中间出膜。紧接螺旋5的loopE又从胞外折回到膜内，将NPA结构置十单体分子的中心，与loopB的NPA结构形成一个合适的角度，并且也在孔内形成了螺旋HE 。 螺旋6靠近螺旋4从膜外穿膜到膜内，其C端位于胞质侧。 螺旋1和3 (36. 70)，螺旋4和6 (40. 90)，螺旋2和5(28. 50)，三组a螺旋交叉成一定的角度对稳定右手螺旋卷曲的AQPl单体有重要的作用。 三组a螺旋交叉在接触的部位都有高度保守的甘氨酸残基，螺旋1和3，螺旋4和6接触部位的残基分别是G1y104和G1y219， 另外有很多的保守的氨基酸残基集中在两个功能性的区域：LoopB和LoopE，并且都靠近单体的中心位置， LoopB和LoopE由NPA结构中的脯氨酸(Pro77和Pro193)之间的范德华力联系在一起，并且几乎互相垂直。 NPA结构中的天冬酰胺与旁边的Va179和Arg195形成氢健，从而使天冬酰胺位于HB和HE的顶端。 LoopB上的His74与保守的Glul7(螺旋1)形成的离子对，将螺旋HB固定在合适的位置，而Arg195与保守的Glul42(螺旋4)形成盐桥，可以固定螺旋HE。而位于他们旁边的Thr80，G1n101，Serl96等极性氨基酸残基可以稳定这些离子对。 AQPl四聚体 水孔蛋白中的水孔 正如在沙漏模型中所推测的， LoopB和E通过NPA结构的相互作用，形成了水孔结构。 范德华力计算出来的最窄的地方的直径为3. 0A，仅比水分子的直径2. 8A大一点点。 AQPl可以每秒通透3x 109个水分子。 3. 0A大小的孔径限制部位位于膜的中央；I1e60(螺旋2) ， Phe24（螺旋1) ，Leu149（螺旋4)和 Val l76（螺旋5)并排在水孔的内表面形成了一个疏水表面，并紧邻NPA结构的Asn76和Asn192。 在孔径有5. 0A的地方有两个组氨酸。His74是高度保守的，并和Glul7形成离子对。His180在选择性水孔蛋白中是保守的，但是在可通透甘油的水孔蛋白中，Gly代替了His。这表明His180对通水的选择性具有一定的作用。 孔内表面的疏水性以及很小的孔径对选择性通水可能具有至关要的作用。 AQP1和AQP2的Hg2+敏感位点分别为Cys l89和 Cysl81，均位于第二个loop环紧接第二个NPA结构处。另外，AQP3的汞敏感位点是Cys11。 AQPl透水的机理 水孔蛋白的孔径主要是限制在膜的中心区域，而在靠近膜表面的孔是很宽大的。因为在孔中的螺旋上有两性氨基酸，在孔的最窄处形成了一个正电区域，水分子中氧原子靠近膜的中央，并且朝向NPA结构，这个限制屏障排除了离子，而可以允许中性分子的通透。 螺旋HB和H