第六章 高通量筛.pptVIP

三、高通量筛选的技术过程 1、样品库 2、初筛和复筛 3、活性化合物 4、深入筛选 5、获得少量先导化合物 6、确证筛选药物药理学研究 7、侯选药物 8、临床前研究 HTS筛选的基本步骤 第一步是选择分子靶。选择的依据是来源于国际医学生物学的新成果。目前国际常用的分子靶有以下几类：A、细胞膜受体；B、离子通道蛋白；C、酶蛋白；D、细胞核受体；E、转运蛋白。 第二步是建立稳定表达分子靶的生物体系。 靶是蛋白---克隆相对应的蛋白，在大肠杆菌中表达和提纯； 靶是细胞受体---克隆出的基因转化到载体细胞中，建立稳定的细 胞株。 第三步建立简便快速的大规模的生物检测方法。 根据靶的不同分为两类： 1、以蛋白等分子为基础； 2、以 细胞为基础 酶蛋白---测定酶活性的变化； 细胞膜受体---测定配体-受体的结合； 细胞核受体---测定蛋白的表达。 在建立大规模生物检测方法的同时，要用组合化合物的方法合成大量不同结构的化合物库相配套。 HTS药物筛选靶点与检测方法 （1）、分子靶点筛选模型---细胞信号通路筛选系统 外界信号从细胞表面传递到细胞内，或者直接穿过细胞膜进入到细胞质和细胞核，最终影响某些基因的转录