第十一章：放射免疫分.pptVIP

第二节 放射免疫分析 * 一、放射免疫分析－基本原理 竞争性结合反应的经 典标记抗原（Ag*）和 非标记抗原（Ag）与限 量抗体(Ab)竞争性结合 Ag*和Ag具有等同的 与Ab结合能力 * Ab限量，Ag*定量, Ag*和Ag的量大于 Ab结合位点，二者 通过竞争方式与Ab 结合；随着Ag增加，Ag*与Ab结合形成Ag*Ab复合物的放 射量降低,二者变化 成函数关系。 * 以未结合的Ag*为 F，Ag*Ab复合物 为B，则B/F或 B/(B＋F)与Ag的 量变存在着函数 关系－剂量反应 曲线 注：T即是B与F的总和 * 二、放射免疫分析－实验方法及测定 抗原抗体反应 Ag* Ag 反应条件 体积 温度 时间 pH Ab (标准Ag/样品Ag) 平衡 /一步法 非平衡 / 二步法 * 分离结合（B）、游离(F)标记物 二抗沉淀法 PEG 沉淀法 PR (二抗+PEG)试剂法 活性炭吸附法 分离彻底，迅速 分离试剂和过程不影响反应平衡 效果不受反应介质影响 操作应简单、重复性好 经济 * 测量、数据处理 晶体闪烁计数器 包括了NaI闪烁晶 体、光电倍增管 以及计数器 测量的放射性信 号是仪器输出的 电脉冲数：每分 钟计数(cpm) 计算 参数 cpm B/T (%) F/T (%) B/F (%) B/B0 (%) 拟合