第十章核酸的分离.pptVIP

* 二、总RNA的分离与纯化 （异）硫氰酸胍-酚氯仿一步法 硫氰酸胍+β-巯基乙醇 裂解细胞 酚／氯仿抽提裂解溶液 异丙醇沉淀 75％乙醇洗涤 RNA pH4.0 * 三、mRNA的分离与纯化 细胞内mRNA特点：含量少 种类多 分子大小不一 mRNA结构特点：多聚腺苷酸尾（polyA） 方法：oligo(dT)-纤维素柱层析法 oligo (dT)-纤维素液相结合离心法 * * 第五节 DNA测序 主要方法: 双脱氧末端终止法 Maxam-Gilbert化学降解法 DNA自动化测序 * 一、双脱氧末端终止法 原理： 模板：单链DNA（待测序的DNA） 酶：大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 引物：5｀端标记的寡核苷酸链 底物：dNTP(AGCT) ddNTP(AGCT) * 反应体系：四组独立的反应体系 每组均含有