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成年山羊延髓的解剖图谱
成年山羊延髓的解剖图谱
C. DEAN,1,2 L. K. GEIGER,1 B. M. SPRTEL,1 P. J. OHTAKE,1 AND H. V. FORSTER1
1密尔沃基威斯康星州生理学医学院53226;
2威斯康星医学院麻醉科和密尔沃基威斯康星州扎布洛茨基退伍军人事务医疗中心53295
本试验开发了山羊脑干的一个解剖图谱用于延髓神经元群体的研究,测定了神经元群体位置变异的影响因素。31个成年山羊的髓质(重17-88公斤)经固定、回收、冻结、连续切片
与0.5%中性红染色,并用光学显微镜观察。将位于中央管进入第四脑室处的脑闩作为零参考点,从此处将后角和中外侧坐标的髓神经元组进行了测定,而从髓质表面开始计算背腹侧坐标。量化了组织随山羊体重的变化,进行线性回归分析提供了体重在在所有三维的调整因素。类似分析收缩百分比在固定和处理中为髓神经元群体的精确坐标提供调整因素。确定神经元群体的准确位置时,应该考虑体重和组织学过程。目前的研究为体重和标准组织学处理提供调整因素用以定位成年山羊大部分重要的延髓神经元群体。
组织学图谱;向斜核;疑核;孤束核
山羊是许多研究中动物模型的选择,包括一些关于呼吸控制的研究[3,7,8,12,15]。虽然大量的研究集中在在延髓神经网络,但是这一区域主要神经元群体的位置在以前出版的山羊脑干图谱中没有明确的界定[18,19]。要成功完成中枢神经网络控制在山羊的研究,需要这一物种脑干主要神经群体详细的位置的组织学图谱。为此,我们已编制了一份山羊髓质的解剖图集并研究神经元群体的立体坐标的影响因素。该图谱不包含髓质核团的详细功能,因其已被相关的出版物[1,5,6,16]详细讨论过。编制本图谱的意图旨在给电生理学家组织学上的援助,通过提供从一个标准的零基准点到延髓神经元组的三维距离,及补偿性调整山羊重量和组织处理的变化来帮助电生理学家定位延髓神经元组。需要适当的生理标准和挑战进一步改进电极的放置。
略缩语
AP 最后区
CC 中央管
CN 楔形核
CON 耳蜗核
ECN 楔外核
FN 面神经核
FNl FN侧枝
FNM FN中间枝
FTL 侧盖
G 薄束核
GVII 膝面神经
HP 舌下核
INT intercalatus
IO 下橄榄核
LRN 外侧网状核
NA 疑核
NAef NA外侧
NTS 孤束核
P 锥体束
PGCL 核巨细胞旁的网状外侧
R 中缝核
RB 索状体
RG 网状核
RTN Retrotrapezoid核
SDM NTS的背内侧亚核
Si NTS的中间体亚核
SM NTS的内侧亚核
SO 上橄榄核
5SP 三叉神经脊束核
5ST 三叉神经脊束
SVL NTS的腹外侧亚核℃
TB 梯形体
TS 孤束
V 前庭神经核
IV 第四脑室
实验材料和方法
本研究的方案获得威斯康星州医学院动物保护和使用委员会的批准。从31只来自阿尔卑斯山、努比亚、和拉芒什海峡品种的成年山羊进行脑干的研究,动物的体重在17-88kg之间变化。其中26只山羊用于有关呼吸调节的生理研究。
山羊先用氯胺酮(肌注氯胺酮;15mg/kg)麻醉,然后插管;1.2%氟烷维持麻醉。对26只山羊中的9只进行了腹侧髓脑神经标志的体内测量。每只羊左侧卧,头旋转到仰卧姿势。暴露腹侧表面的髓质,将气管缩回侧面,通过中线切口查看枕骨大孔。钻开颅底枕骨,除去硬脑膜。
暴露外展神经(NVI)和舌下神经(nXII)的神经根,以便在第VI和第XII神经之间,其出髓质处进行横向和喙尾测量。这些数据随后与固定、组织化学处理、安装(后处理)后的测量值比较,以确定脑干收缩的程度。通过线性回归分析得到收缩与体重之间的关系。
在全麻的状态下,将导管插入颈动脉灌注大脑。对山羊进行安乐死(静注戊巴比妥钠;90mg/kg)。通过颈动脉插管灌注PBS(0.1M),直到离体的颈静脉中渗出物变干净。随后,灌注4-5L含4%多聚甲醛的0.1M PBS固定液30分钟以上。
取脑干放在在含10%蔗糖的PBS中于4℃贮存,直到大脑沉底(1-2天),之后冷冻保护剂蔗糖的浓度其时增加至20%,然后加到30%。
在冷冻超薄切片机(Reichert-Jung Cryocut 1800)上切成冷冻的髓质横截面(40μm)用于组织学分析。连续切片放在用铬明矾处理过的片子上,然后用0.5%中性红染色。在光学显微镜下找出主要的脑干神经核。测量了迷走神经背核(X)、舌下神经(XII)、疑核(NA)的喙极及面神经核(FN)尾极相对于脑闩(中央管进入第4脑室的位置)、中线和背侧或腹侧表面的位置。将从核极到脑闩的距离与体重的关系进行线性回归分析。
脑干切片在带数码相机的显微镜(Leaf Microl
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