胃上皮化生和幽门螺杆菌超威结构的观察.docVIP

胃上皮化生和幽门螺杆菌超威结构的观察 为研究和证实十二指肠胃上皮化生(GM）与幽门螺杆菌及（Hp）十二指肠溃疡的发生之间关系作者进行了如下超显微结构的观察，现报告如下。 1 材料和方法 1.1 材料 均为我院内镜检查的患者，内镜检查结合病理切片观察严格选材，18例球部标本，其中十二指肠溃（DU）13例，慢性十二指肠炎3例，正常十二指肠2例；1例窦部标本（有活动性炎质）作透射电镜观察，8例球部标本，包括DU5例，慢性十二指肠炎2例，正常十二指肠1例作扫描电镜观察。球部标本一块放入4%戊二醛固定液内做电镜观察，另一块放入10%福尔马林液固定，作组织化学染色。 1.2 方法 1.2.2 透射电镜观察 采用日立牌H700型透射电镜。标本常规在4%戊醛内固定和在1%四氧化锇（OsO4）的1h后脱水，包埋，先制备1μm厚的半薄切片，1%NaOH溶于酒精作软化剂，软化树脂20min至1h，常规HE染色后在光镜下定位，制500nm超薄切片，醋酯双氧钠，柠檬酸铝双染色后电镜观察。 1.2.2 扫描电镜观察 为上述透射电镜之扫描附件。固定同上；丙酮梯度脱水；醋酸异戊脂置换；CO2临界点干燥；立体显微镜下定位；离子喷镀仪镀铂后观察。 1.2.3 复染色方法 将数块活检标本放入盛有1～2ml生理盐水的无菌试管内，以3000转/分 转速离心后取悬液，用Formvar-碳沫酮附上述悬液2min,1%～2%磷钨酸水溶液（pH6.5～7.4）染色1min～2min后，立即在透射电镜下观察。 2 结果 用AB（pH2.5）/PAS染色，根据十二指肠绒毛上皮形态，分化程度将其分为正常、胃上皮化生（Ⅰ型-分ⅠA和ⅠB两亚型和不表现明显上皮化生（Ⅱ型无奇不有类，见表1。 A表现为绒毛萎缩、粘膜表面呈波浪状，粘膜表层上皮完全由化生的胃表面粘液细胞（即GMC）组成。GMC胞浆内含大量的PAS阳性物质，化生区无杯状细胞（图略）。18例DU有6例呈ⅠA表现，内镜下大多有明显溃疡灶，边缘有瘢痕组织形成，底部无明显苔膜覆盖，甚至溃疡被瘢痕组织填平（即H期和S期）。ⅠB型表现为绒毛形状在萎缩到正常之间，可见正常杯状细胞和吸收细胞点缀在GGM之间，GMC胸浆内只有少量的PAS阳性物质（图略）。10例DU和2例慢性十二指肠炎表现为ⅠB型改变，内镜下表现有明显溃疡灶及周边明显充血、水肿，底部有较厚的苔膜覆盖（即A期）。Ⅱ型表现为杯状细胞、吸收细胞和绒毛形状正常，在吸收细胞胸浆内见PAS阳性小滴，杯状细胞数量可轻度增加。2例DU表现为Ⅱ型改变，内镜下表现粘膜明显充血、水肿和渗出及浅表溃疡的形成，为溃疡早期阶段。3例内镜下正常十二指肠粘膜组织学上亦正常。 表1 DU边缘粘膜表面形态学分型 分 型 绒毛形状 GMC 吸收细胞 杯状细胞 Ⅰ型ⅠA 萎缩或粘膜表面呈波浪状 PAS阳性物质个别含少量 无 无 ⅠB 萎缩到正常 含少量PAS阳性物质 可见正常吸收C 可见 Ⅱ型 正常 无GMC 含少量PAS阳性物质滴 轻度增加 △GMC：the metapiastic gastric surface mucus secreting cells 透射电镜观察，正常杯状细胞游离面是由大量指状微绒毛密集平行排列形成纹状缘，微绒毛表面覆以质膜及分支状多糖-蛋白质复全物（glycocaluyx,GX），胞质内含有各种细胞器，如丰富的滑面内质网，许多粗面内质网，发达的高尔基复合体以及线粒体和溶酶体，胸质内无粘原颗粒。光镜下表现为Ⅱ型的吸收细胞表面策绒毛排列紊乱、断裂，相邻微绒毛互相融合增宽，有时微绒毛受侵，在质膜下仅见一个完整的微绒毛核心，微绒毛外层的多糖-蛋白质复合物中断、变薄甚至消失。胸浆内无明显粘原颗粒，细胞器形态及排列正常；ⅠB型的吸收细胞除表现为上述微绒毛改变外，胞浆内见大小不等，分布不均和电子密度不同的粘原颗粒。细胞器萎缩，消失或被挤压在胸浆两侧。在GMC之间可见到正常的杯状细胞；ⅠA型吸收细胞除表现ⅠB型外，胞浆内粘原颗粒更为密集、丰富，有时在细胞表面可见到粘液层。GMC形态与胃表面粘液柱门面细胞相似；扫描电镜观察，GM区表面绒毛萎缩，紊乱甚至平坦，表面粗糙呈颗粒状。 3例DU边缘粘膜组织和1例窦部组织光镜下和电镜下发现Hp。透射电镜下，球部及窦部所见Hp形态特征相似，胞壁具有双层膜结构，在两层膜间常见局部加宽，在菌体一端可见1～4条有鞘鞭毛，有时可见箍缩分裂相。Hp均局限在胃上皮化生区，与GMC膜间常以垂直方向的丝状物相连，此丝状物附着处及其附近微绒毛断裂、消失或增宽，菌体周围组织被溶解，并可见游离的细胞碎片、粘膜破坏，失去连续性等现象（图略）。两例DU边缘活检组织复染样本中，1例检出Hp，其形态特征与窦部检出的Hp相似。 3 讨论 十二指肠胃上皮化生（GM）是指十二指肠粘膜，特别是球部膜