七氟醚对老龄大鼠海马Tau蛋白磷酸化影响.pdfVIP

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2017-05-15 发布于上海
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七氟醚对老龄大鼠海马Tau蛋白磷酸化影响.pdf

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七氟醚对老龄大鼠海马Tau蛋白磷酸化影响

目录目录第1章引言1 2 4 第章实验材料 2.1实验动物，试剂及药品4 2.2主要仪器设备4 3 5 第章实验方法 3.1动物及麻醉方法5 3.2Morris水迷宫测试5 3.3标本准备6 3.4GSK－3β和PKA的检测7 3.4.1GSK－3β激酶检测7 3.4.2PKA激酶检测8 3.5免疫印记法检测蛋白磷酸化的表达9 3.5.1组织蛋白提取9 3.5.2Tau蛋白含量的测定9 3.5.3SDS—PAGE凝胶电泳10 3.5.4 转膜10 3.5.5免疫反应11 3.5.6化学发光，膜的显影和定影11 3.6 海马组织标本制作及HE染色12 3.7统计分析12 第4章实验结果13 4.1Morris水迷宫测试13 4.2GSK 3β PKA 14 －和激酶水平 4.3Tau蛋白（Tau-pSer396，Tau-pSer262）蛋白的磷酸化15 4.4海马HE染色16 5 17 第章讨论 5.1吸入七氟醚对水迷宫实验的影响17 IV 目录 5.2吸入七氟醚对海马神经元的影响18 5.3吸入七氟醚对Tau蛋白的影响18 5.4吸入七氟醚对GSK-3β和PKA水平的影响19 5.5结论及本实验的意义和待解决的问题20 参考文献22 综述26 V 第1章引言第1章引言术后认知功能障碍（PostOperativeCognitiveDysfunction,POCD）定义为术前无任何精神障碍的患者，因为各种因素，手术后出现大脑功能失调，导致患者认知、行为、意志的改变及记忆力受到损害。POCD对于老龄患者已经成为 1200 60 威胁围术期患者安全的重要因素，有研究表明，例岁以上患者行非心脏手术后，术后一周内发生POCD的几率为27 ，术后三月仍然存在POCD的［1］几率为10 。随着中国人口老龄化的到来，越来越多的老年患者需要手术，有研究表明老年患者的POCD发生率大大高于年轻的患者。尽管大多数的患者［1,2］能在一周内症状完全消失，但也有部分患者症状持续数周甚至数月。目前对于POCD的研究很多，但引起POCD的机制尚不完全明了，原因在于在此类临床试验中，试验设计者很难将麻醉与手术和其他一些生理因素区分开来。大量的动物实验表明，吸入性全身麻醉药可影响动物的学习和记忆，并且 [3， 4] 这一作用可持续数周或数月，其对术后记忆产生影响的机制较为复杂，如大脑细胞凋亡，淀粉样蛋白的沉积和突触传递的抑制等[5，6，7]。有研究表明，异 [8] 氟醚可通过线粒体途径诱导蛋白酶的激活和细胞的凋亡。研究显示