缺氧模型和多因素模型构建结核休眠菌模型比较研究.pdfVIP

中国人兽共患病学报 2016 , 32 (4) Chinese J ournal of Zoonoses 327 DOI: 10. 3969/j. issn. 1002 - 2694.2016.04.003 缺氧模型和多因素模型构建结核体眠菌模型比较研究 江莉莎1·2 ，姚义勇气张莉1 ，柳岩1 ，郭述良I 摘 要2 目的 比较缺氧模型及多因素模型两种结核休眠菌建模方法的优劣。方法 利用缺氧因素构建缺氧模型;利用 低氧(5 % O ) 、高 CO (10% CO ) 、弱酸(pH 5.0) 及营养缺乏00% 7H9 液体培养基)多种因素构建多因素模型。分别在第 2 2 2 20 d , 30 d 时取样，用金胶 G尼罗红染色法染色，在共聚焦显微镜下观察结核菌脂质聚集及失去抗酸性的情况;用电镜观察结 核菌细胞壁增厚情况;并检测其对利福平的耐药率。在建模 30 d 时，将等量的两种模型分别转入新鲜 7H9 液体培养基中，观 察并比较其复苏情况。结果 建模 20 d 时，两模型组细菌均出现脂质聚集及失去抗酸性，无明显差异。两模型组细菌均未出 现明显细胞壁增厚。建模 30 d 时，多因素模型组细菌几乎都表现出脂质聚集及失去抗酸性，而缺氧模型组仍有部分细菌未表 现出脂质聚集及失去抗酸性。同时，多因素模型组在建模 30 d 还出现了细胞壁增厚的细菌，缺氧模型组则无明显改变。多因 素模型组细菌对利福平的耐药率明显高于缺氧模型组，且多因素模型组细菌复苏的菌量远小于缺氧模型组。结论 多因素 模型较缺氧模型能更快诱导结核菌进入休眠状态，且诱导出的结核休眠菌状态更稳定。 关键词:结核休眠菌;缺氧模型;多因素模型;比较 中图分类号:R378 文献标识码:A 文章编号: 1002 - 2694(2016)04 一 0327-05 Comparative study of two in vitro dormant models for Mycobacterium tuberculosis JIANG Li-sha 1. 2 , Y AO Yi-yong 1 , ZHANG Li 1 , LIU Yan 1 , GUO Shu-liang1 (l. Department of Res户iratory and Critical Care Medicine , the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University , Chongqing 400016 ,China; 2. The first branch the First Affiliated Hosρital of Chongqing Medical University , Chongqing 400016 ,China) Abstract: To compare the oxygen-deficit model with the multipl~stress model ,and understand their pros and cons ,the oxy- gen-deficit model was constructed by applying gradually low oxygen. The multipl~stress model was developed by applying combined stress of low oxygen (5 % O2 ) ,high carbon dioxide 00 % CO2 ) , faintly acid (pH 5. 0) and lack of