西农萨能羊泌乳高峰期和初期乳腺组织差异表达基因研究.pdfVIP

畜牧兽B援学报 2008.39(2):136-142 Acta Veteγinaria et Zootechnica Siníca 西农萨能羊泌乳高峰期和初期 乳腺组织差异表达基因研究 武会娟，罗 军\张丽娟，韩雪峰，杨宝进，王海滨 (西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100) 摘 要:利用抑制性削减杂交和实时JE 最 PCR 研究荫农萨能羊泌乳离晦期毅异表埠恭因，结果表明成功构建泌乳 5 高峰期和泌乳初期乳腺组织差异表达削减 cDNA :t廊，以 GAPDH 为指标检测)c库削减效率为 2 倍，共挟得 78 个 阳性克隆.PCR 检测插入片段主要分布在 150-1000 忡，挑选插入片段不等的 30 个克隆测序，获得 25 个有效序 列，代表 18 个基因。对文库中所包含的血清淀粉样蛋白 A3(SAA剖，ATP 结合盒亚家族 G 成员 2(ABCG2) ，心脏 型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和黄蝶岭脱氢酶(XDm进行实时定量 PCR 检测，发现上述 4 个基因在泌乳高峰期乳 腺组织中的表达水平分别是泌乳初期的 17.0 ， 7.7 ， 16.3 和1. 7 倍。结论:构建的消减文库可用于筛选泌乳高峰期 是异暴网，已鉴定的 4 个基因很可能是调控产奶量和乳成分变化的候选慕因. 关键诩:西农萨能斗Ep 乳腺组织p 抑制性削减杂交;基因整界表达;实时定量t PCR 中圄分类号:S826. 9+ 4.2 文献标识码:A 文章编号:0366-6964 (2008 )02-0136翩。7 Studies on Differentially Expressed Genes in Mammary Gland of Xinong Saanen Goat at Peak and Early Lactation Stages WU Hui-juan , LUO Jun* , ZHANG Li-juan , HAN Xu e-feng , YANG Bao-jin. WANG Hai-bin (College 0/ Animal Science and Technology , Northwest AF University , Yangling 712100 ,China) Abstract: Suppression subtractive hybridization technology and real-time quantitative PCR were used to isolate differential expressed genes in peak lactation stage. Results showed that peak to early subtraction library was successfully bui1t with cDNA from mammary gland of Xinong Saanen goat at the two lactation stages , and the subtraction effíciency was approximately 25 fold indicated by GAPDH; PCR analysis of the tota1 78 positive clones demonstrated that the cDNA inserts range largely from 150 bp to