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阴沟肠杆菌染色质ampD基因定点突变致AmpCβ-内酰胺酶由非持续高产型转变为持续高产型.pdf
• 4 • 目标检验医非崇志2010 年 1 月.31 卷第 1 期 In. J l.ab Mcd.Jan咀町 2010. VoI. 31.No. 1
·论著·
阴沟肠杆菌染色质 ampD 基因定点突变致 AmpC ß-内酿胶酶
由非持续高产型转变为持续高产型
涂 婉，赵庞
( 复旦大学附属华东医院检验科，上海 200040)
E偏要3 目的 丁解 ampl)基因特异突变对阴沟肠忏阙 ^mpC ß- 内IiU!é酶由才在持续，向产型转变为符续高产型的影响闵素
ñ法 筛选染色质介导的指续高产现八mpC ß- 内同UIé酶的阴沟肠抨曲曲.扩增其 amp!) 基~并测序，确定其布义突变位点. 采用定
点突变的方法对g野生碍阴沟~柯:商进行 七述特异ft7.点的突变.m头抱洒了. .虫在试4盘测定突变前后两株产 M类型的改变. 结果
1 21 株阴沟肠忏菌中 1 5 **为染包质介导的持续高产硝. 共筛选Hl 8 个有义突变优点.形成 7 栋~点失i:筒株. Ecl MA(274 位插
入 A) 、 Ecl MC(327 位缺失C) 和 Ecl MF(27 位编入G)由非持续高产型转变为持续尚产主1. 而 Ecl Ml:H371 价销人 T) ， Ed MD
(515 位缺失。、EcI ME(324C斗A)、EcI MC(两点同时的突变.238C→A.302T→A)的产量单类型未发生变化.结论 能够引起产
酶类型发生改变的 ampl)基因特异突变均为可造成大片段氨来酸改变的根移突变，并且该改变至少从 124 位之前的氨基酸开始.
但并·不排除部分持续高产哥哥 AmpC ß- 内航胶酶的产生布在其他调控机制.
E关键词] ß 肉Mß安街炎， 肠忏街，阴沟s 基因g 突变
中阁分3居号:R446. 61.R378. 2 文商量标识码:A 文章编号:1673-4130(20 10)01 -0004-04
Spedfic mulalions ()f ampD gene leading 10 the emet)lence of derepre回ed hlgh-productlon of AmpC IHactamase
TU Wan ,ZHAO Hu. IJ,partment 01 Clin;cal La加ratory. H阳ulonf( Hn,pital 01 Fudω， Univenity. $ha71ghai 200040.China
[ Abslract] Objective 10 reveal the influence (act r of ampD specific muta!ion on the trans(ormation of ^mpC ß• lactamase
from non-hig h-productive type 10 dcrepre,,ed the hígh-productíve type in Enlerobacter c103四ι Meth创5 1he selected ch romati n-
mcd町ted derepresscd high -produclive 8trs;n弱 of Enterobacter cloacae and genomic DNA were extracted . aod genomic ampl) wa s
amplified by using PCR. and then sequeoced and confi rmed by specific mUlation . Use sile-direcled mUl8genesis 10 mulale Ihc w ild-
type Enlcrobacter c1 0acae for Ihc above site. The changes
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