产表面活性剂根际菌协同龙葵修复镉.pptVIP

菌株在牛肉膏蛋白胨培养基中 振荡培养20 h。 之后离心收集菌体，洗涤3 次后重新悬浮于0.85%的生理盐水，使菌液浓度约为1×108 cfu/mL 取1 mL 菌液分别加入装有不同镉浓度供试土壤10 g 的50 mL 离心管中 之后离心收集菌体，洗涤3 次后重新悬浮于0.85%的生理盐水，使菌液浓度约为1×108 cfu/mL 不同镉浓度 同时另一个离心管加无菌水设为空白对照（CK) 加入 菌株 空白组 加入 菌株 空白组 土壤镉含量 10 mg/kg 土壤镉含量 25 mg/kg 土壤镉含量 50 mg/kg 土壤镉含量 100 mg/kg 于温室下放置20 天后，分别以水土比1： 2 加入去离子水。 28 ℃下，120 r/min 振荡2 h 之后，12 000 r/min 离心10 min，取上清液用原子吸收分光光度计测定土壤中可溶出态镉的含量。 盆栽实验： 是用盆钵栽培作物进行农业科学实验的一种方法。由于盆钵体积小、栽培植株的数目也少土壤、肥料、水分等条件容易控制。如果放在温室中，温度、湿度、光照等条件也能加以控制，这就为保证实验的顺利进行和精确性创造了有利条件。 龙葵种子首先经2%次氯酸钠表面消毒， 然后让其在含有营养液的培养皿中发芽生长 龙葵种子首先经2%次氯酸钠表面消毒， 然后让其在含有营养液的培养皿中发芽生长 20 天后选择长势一致的幼苗移栽至上述盆中，每盆1 颗。 20 天后选择长势一致的幼苗移栽至上述盆中，每盆1 颗。 加入 菌株 空白组 加入 菌株 空白组 土壤镉含量10 mg/kg 土壤镉含量25 mg/kg 土壤镉含量50 mg/kg 土壤镉含量100 mg/kg 移栽5 天后，待植株生长良好后，在植物根部接入约1×107 cfu/g培养至对数期的菌液 其中每个浓度设添加菌株和不 加菌株两个处理，每个处理设3 个平行样。 在450 mL 的塑料盆中分别装入不同镉浓度的老化后的土样400 g，之后在100 ℃下高温灭菌1 h，连续3 次。 供试土样，风干后过筛，分别加入不同含量的溶液态氯化镉，使土壤中Cd 的浓度为0（不加），10，25，50和100 mg/kg，土壤充分混合并老化2 个月。 土壤镉含量 0 mg/kg 定期浇水，保持8 h/d 的光照，植株在温室下生长60 d 后收获。 根系洗净后用10 mmol/L 的EDTA 溶液浸泡30 min，再用去离子水冲洗干净以去除表面附着的重金属离子。 植株先测量地上部高度，根茎叶分开然后在105 ℃下杀青烘干2 h，称取根、茎和叶组织的干重。植物组织经HClO4： HNO3（优级纯1： 4）消解后用Z-2000型原子吸收分光光度计测重金属浓度。 1、菌株的分离与鉴定 命名为：LKS06 在普通细菌培养基上生长良好，菌落圆形，深绿色，凸起，边缘光滑，菌株细胞杆状，革兰氏染色呈阴性。 与Pseudomonas oryzihabitants 有较高的同源性，将其鉴定为假单孢菌属。 NOTE：专性需氧的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌,呈杆状或略弯。具端鞭毛，能运动。 NOTE：系统发育树：系统学分类时，用一种类似树状分支的图形来概括各种（类）生物之间的亲缘关系。是最常用的可视化表示进化关系的方法 2、菌株LKS06的促生特性及重金属抗性 菌株LKS06 具有较好的产铁载体和产吲哚的能力； 其中产IAA的量最大； 具有很强的重金属耐受性。 结论： NOTE： ACC 脱氨酶：可将植物乙烯前体ACC 分解成为a-丁酮酸和氨，从而大大减 少植物有害乙烯的产生，促进植物的生长发育； 铁载体：为一种专门结合铁的小分子蛋白，可从土壤中收集铁，从而满足植物对铁的需求； 生长素IAA：可以刺激植物根系的发育和调控植物其他生命活动。 3、菌株对土壤中重金属镉的活化能力 菌株LKS06的添加，显著增加了土壤中镉的可溶出性 在50mg/kg的土壤中，镉的浸出是不添加菌的对照的2.7倍。 结论： 4、菌株对龙葵生物量的影响 在重金属环境下，龙葵的生长受到不同程度的抑制，而接菌LKS06 的盆栽中龙葵的生物量均高于未接菌的对照。 结论： 菌株帮助龙葵抵抗重金属胁迫，帮助其生长 23.6% 4.5% 21.2% 16.3% 在未污染的土壤中，接菌的作用效果不明显（p＞0.05） 5、菌株对龙葵富集镉的影响 接菌LKS06 还能影响植物对镉的吸收，龙葵根茎叶各组织内的镉浓度均高于没接菌的对照。 在镉100 mg/kg 的高浓度下，菌的作用不明显。 能显著提高龙葵在修复镉污染土壤的效率 结论： （1）从重金属污染的废矿区分离得到一株能产生物表面活性剂的