猪瘟活疫苗(传代细胞源)成品检验课件.pptVIP

7 效力检验 下列方法任择其一 7.1 用兔效检 按瓶签注明头份，用无菌生理盐水将每头份疫苗稀释1/7500头份/ml，耳静脉注射体重为1.5～3.0kg兔2只，每只l.0ml。接种后，上、下午各测体温1次，48小时后，每隔6小时测体温1次，根据体温反应和攻毒结果进行综合判定。 7 效力检验 7.1.1 兔接种疫苗后，体温反应标准如下： 定型热反应(++) 潜伏期48～96小时，体温上升呈明显曲线， 至少有3个温次超过常温1℃以上，并稽留18～36小时。如稽留42小时以上，必须攻毒，攻毒后无反应可判为定型热。 轻热反应(+) 潜伏期48～96小时，体温上升呈明显曲线，至少有2个温次超过常温0.5℃以上，并稽留12～36小时。 可疑反应(?) 潜伏期48～96小时，体温曲线起伏不定，稽留不到12小时；或潜伏期在24小时以上，不足48小时及超过96小时至120小时出现热反应。 体温反应呈二次高峰，有一次高峰符合定型热反应(++)或轻热反应(+)标准者，均须攻毒。攻毒后无反应时，该兔热反应可判为定型热或轻热反应。 无反应(－) 体温正常。 7 效力检验 7.1.2 结果判定： 注苗后，当2只兔均呈定型热反应(++)，或1只兔呈定型热反应(++)、另1只兔呈轻热反应(+)时，疫苗判为合格。 注苗后，当1只兔呈定型热反应(++)或轻热反应(+)，另1只兔呈可疑反应(?)；或2只兔均呈轻热反应(+)时，可在注苗后7～10日攻毒(接种新鲜脾淋毒或冻干毒)。攻毒时，加对照兔2只，攻毒剂量为50～100倍乳剂。每兔耳静脉注射1ml。 7 效力检验 攻毒后的体温反应标准如下： 热反应(+) 潜伏期24～72小时，体温上升呈明显曲线，超过常温1℃以上，稽留12～36小时。 可疑反应(?) 潜伏期不到24小时或72小时以上，体温曲线起伏不定，稽留不到12小时或超过36小时而不下降。 无反应(－) 体温正常。 攻毒后，当2只对照兔均呈定型热反应(++)，或1只兔呈定型热反应(++)，另1只兔呈轻热反应(+)，而2只注苗兔均无反应(－)，疫苗判合格。 7 效力检验 注苗后，如有1只兔呈定型热(++)或轻热反应(+)，另1只兔呈可疑反应(?)或无热反应(－)，可对可疑反应兔或无反应兔采用剖杀或采心血分离病毒的方法，判明是否隐性感染；或注苗后，2只兔均呈轻热反应，亦可对其中1只兔分离病毒。 效力检验 分离病毒方法是：接种疫苗后96～120小时之间，将兔剖杀，采取脾脏，用生理盐水制成50倍稀释乳剂(脾乳剂应无菌)，或采取心血(全血)，接种2只兔，每只兔耳静脉注射1ml。凡有1只兔潜伏期24～72小时出现定型热反应(++)，疫苗可判为合格。 7 效力检验 重检规定 接种疫苗后，由于出现其他反应情况无法判定时，可重检。用兔做效力检验，应不超过3次。 7 效力检验-用猪检验 7.2 稀释与免疫 按瓶签注明头份，用灭菌生理盐水将每头份稀释1/3000头份/ml，肌肉注射无猪瘟中和抗体的健康猪5头，每头l.0ml。 7 效力检验-用猪检验 7.2 攻毒与判定 10～14日后，连同条件相同的对照猪5头，各注射猪瘟病毒石门系血毒1.0ml(105.0MLD)，观察16日。对照猪全部发病，且至少死亡3头，免疫猪全部健活或稍有体温反应，但无猪瘟临床症状。 8 剩余水分测定 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合规定。 8.1 将干净的称量瓶逐个做好标记，然后置150℃干燥箱中烘干2小时，待温度下降至60~70℃时，移入由无水氯化钙的玻璃干燥瓶中备用。 8.2 接通天平电源，开显示器，校准（校准前至少预热60分钟）。 8.3 接通真空干燥箱电源，打开开关，将温度调节到40℃进行预热。 8 剩余水分测定 8.2 接通天平电源，开显示器，校准（校准前至少预热60分钟）。 8.3 接通真空干燥箱电源，打开开关，将温度调节到40℃进行预热。 8 剩余水分测定 8.4 取出待检样品。 8.5 天平的显示屏全零时，置称量瓶于称盘上，天平的显示屏自动显示称量瓶的重量（称量瓶重W1），待稳定后读数，记录称量瓶的重量及标记号。 8.6 取下称量瓶上的称量瓶，打开疫苗瓶，迅速将样品捣碎，倒入已知重量的称量瓶中，然后盖好瓶盖再次称重（瓶重+样品重W2,），记录读数，然后将其移入无水氯化钙的玻璃干燥瓶中。以此类推各瓶依次进行。 8 剩余水分测定 8.7 待被检样品称重全部结束后，立即将玻璃干燥瓶中盛有样品的称量瓶全部移入有五氧化二磷的真空干燥箱内，使瓶与瓶之间摆放有一定距离，然后打开瓶盖，关闭真空干燥