AccQTag法测定复方氨基酸注射液(18AAⅤ)中17种氨基酸的含量.docVIP

AccQTag法测定复方氨基酸注射液(18AA)中17种氨基酸的含量 作者：陈宇堃,梁蔚阳,薛巧如,王淼 【摘要】 目的 建立测定复方氨基酸注射液(18AA)中17种氨基酸含量的 方法 。方法 采用AccQTag法，以6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，与复方氨基酸注射液(18AA)中17种氨基酸柱前衍生，用Waters 2695 HPLC仪器，AccQTagTM柱，以醋酸钠(pH4.95)缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B，水为流动相C进行梯度洗脱，检测波长为248 nm，柱温为37 ，进样量为5 μL。结果 17种氨基酸的线性回归方程r值为0.999 6～0.999 9(n=5)，平均回收率为93.3%～104.4％（RSD值为0.88%～3.05％，n＝6）。结论 本法快速，简便，结果准确。 【关键词】 AccQTag法；复方氨基酸注射液(18AA)；6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）；柱前衍生化法 　　Abstract:Objective To analyze the contents of 17 amino acids in compound amino acid injection using AccQTag method. Methods The amino acids in the injections were pretreated with 6aminoquinolylNhydroxysuccinimdyl separately and thEir derivatives were analyzed on Waters 2695 HPLC using AccQTag column. Gradient eluents consisted of sodium acetate solution (pH4.95), acetonitrile and water. The Detection wavelength was 248 nm and column temperature 37 ℃. Results The calibration curves for 17 amino acids had good linearity(r=0.9996～0.9999,n=5). The mean recoveries of 17 amino acids were 93.3%～104.4% with RSD 0.88%～3.05%(n=6). Conclusion The method is quick, simple for the content analysis of the amino acids in the injections. 　　Key words:AccQTag method; compound amino acid injection; 6aminoquinolylNhydroxysuccinimdyl carbaminate(AQC);precolumn derivatization 　　复方氨基酸注射液(18AA)主要含17种氨基酸，包括门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、盐酸组氨酸、盐酸精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、盐酸赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。复方氨基酸注射液用于 治疗 由于胃肠道疾病引起的消化和吸收障碍而造成的蛋白质缺乏症；因手术创伤、烧伤而需要增强蛋白质消耗者；因某些疾病而引起的低蛋白血症；在手术前后营养不良时，增加氨基酸的供应使体内达到正氮平衡，促进伤口愈合，体力恢复；消耗性疾病或癌症因化疗引起的食欲降低，需补充蛋白质摄入的患者［1］。本文采用AccQTag方法［2，3］测定该制剂的氨基酸含量，以6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂与各氨基酸柱前定量衍生后，再经AccQTagTM柱梯度洗脱。结果表明本方法具有专属性，且简便、快速、灵敏度高、重现性好。 　　 1 试剂与试药 　　 　　门冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、盐酸组氨酸(His·HCl·H2O)、盐酸精氨酸(Arg·HCl)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、甲硫氨酸(Met)、盐酸赖氨酸(Lys·HCl)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)对照品均为 中国 药品生物制品检定所提供（批号：624—200104），质量分数均为100.0％。6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（简称AQC）、AQC稀释液和硼酸盐缓冲液（pH8.8）均为WATERS公司提供。复方氨基酸注